Kvantitatívne stanovenie tanínov podľa GF 13. Dobrý deň študent

Izolácia z liečivých rastlinných surovín ... Taníny sú zmesou rôznych polyfenolov so zložitou štruktúrou a sú veľmi labilné, preto izolácia a analýza jednotlivých zložiek tanínov predstavuje veľké ťažkosti. Na získanie množstva tanínov sa liečivé rastlinné suroviny extrahujú horúcou vodou, ochladia sa a potom sa extrakt postupne spracuje:

Petroléter (čistenie z chlorofylu, terpenoidov, lipidov);

Dietyléter, ktorý extrahuje katechíny, kyseliny hydroxyškoricové a iné fenoly

Etylacetát, do ktorého sa prenášajú leukoantokyanidíny, estery kyseliny hydroxyškoricovej a pod. odlišné typy chromatografia. Použitie:

a) adsorpčná chromatografia na celulózových kolónach,

b) deliaca chromatografia na silikagélových kolónach;

c) iónomeničová chromatografia;

d) gélová filtrácia na kolónach Sephadex a pod.

Identifikácia jednotlivých tanínov je založená na porovnávaní Rf v chromatografických metódach (na papieri, v tenkej vrstve sorbentu), spektrálnych štúdiách, kvalitatívnych reakciách a štúdiu produktov štiepenia (pre hydrolyzovateľné taníny).

Kvantifikácia tanínov ... možno rozdeliť na gravimetrické, titrimetrické a fyzikálno-chemické.

Gravimetrické metódy na základe kvantitatívneho vyzrážania tanínov soľami ťažké kovy, želatína alebo adsorpcia so želatínovým práškom. Jednotná metóda váženia (BEM) široko používané v kožiarskom priemysle. Metóda je založená na schopnosti tanínov vytvárať pevné väzby s kožným kolagénom. Na tento účel sa získaný vodný extrakt z liečivých rastlinných surovín rozdelí na dve rovnaké časti. Jedna časť sa odparí, vysuší a odváži. Druhá časť je ošetrená kožným (gélovým) práškom, filtrovaná. Filtrát sa odparí, vysuší a odváži. Rozdielom medzi suchými zvyškami 1 a 2 dielov (t.j. kontrola a pokus) sa určí obsah tanínov v roztoku.

Titračná metóda zaradená do GF-XI, označovaná ako Leventhal-Neubauerova metóda, je založená na oxidácii fenolových OH skupín manganistanom draselným (KMnO 4) v prítomnosti kyseliny indigosulfónovej, ktorá je regulátorom a indikátorom reakcie. Po úplnej oxidácii tanínov sa kyselina indigosulfónová začne oxidovať na izatín, v dôsledku čoho sa farba roztoku zmení z modrej na zlatožltú. Ďalšou titračnou metódou na stanovenie trieslovín je metóda zrážania tanínu síranom zinočnatým s následnou komplexometrickou titráciou trilonom B za prítomnosti xylénovej pomaranče, ktorá sa používa na stanovenie tanínu v listoch sumachu a trieslovín.

Fyzikálnochemické metódy stanovenia tanínov:

1) kolorimetrické- DV poskytujú farebné zlúčeniny s fos-molybom alebo fos-volfrámom do-mi v prítomnosti Na2C03 alebo s Folin-Denisovým činidlom (pre fenoly).

2) chromatograficko-spektrofotometrická a nefelometrické metódy, ktoré sa využívajú najmä vo vedeckom výskume.

Rozšírenie v rastlinnej ríši, podmienky vzniku a úloha rastlín. V obilninách je zaznamenaný nízky obsah trieslovín. V dvojklíčnolistových sú niektoré čeľade - napríklad ružiak, pohánka, strukoviny, vŕba, sumach, buk, vres - veľa rodov a druhov, kde obsah trieslovín dosahuje 20-30% a viac. Najvyšší obsah trieslovín majú patologické útvary – hálky (až 60 – 80 %). Drevité formy sú bohatšie na triesloviny ako bylinné. Taníny sú nerovnomerne rozložené v orgánoch a tkanivách rastlín. Hromadia sa najmä v kôre a dreve stromov a kríkov, ako aj v podzemných častiach bylinných trvaliek; zelené časti rastlín sú oveľa chudobnejšie na triesloviny.

Taníny sa hromadia vo vakuolách a počas starnutia buniek sa adsorbujú na bunkové steny. Rastliny najčastejšie obsahujú zmes hydrolyzovateľných a kondenzovaných tanínov s prevahou zlúčenín jednej alebo druhej skupiny.

S vekom rastlín množstvo tanínov v nich klesá. Rastliny rastúce na slnku akumulujú viac tanínov ako tie, ktoré rastú v tieni. V tropických rastlinách sa tvorí podstatne viac tanínov ako v rastlinách miernych zemepisných šírok.

Biomedicínske pôsobenie a využitie tanínov ... Taníny a LR ich obsahujúce sa používajú najmä ako adstringentné, protizápalové a hemostatické látky.

A. Prevažne hydrolyzovateľné:

RhizomataBistortae – Hadovité odnože.

Highlander serpentine (hadí koreň, cievka) (Polygonumbistorta) - sem. pohánka, Polygonaceae

Chemické zloženie liečivých rastlinných surovín: 15-25% triesloviny, hlavne hydrolyzovateľné, galová, elagová, askorbová, fenolkarboxylové a organické kyseliny, flavonoidy (kvercetín)

Hlavné pôsobenie lieku: adstringentný, antiseptický.

Povaha aplikácie... Nálev a odvar sa používajú ako sťahujúce, hemostatické, protizápalové pri miernom krvácaní v zažívacom trakte, akútnych a chronických zápaloch žalúdka, otrava jedlom, dermatózy, popáleniny, zápaly ústnej dutiny, pošvy, hemoroidy.

FoliaCotinuscoggygriae – Skumpia kožené listy.

Skumpia koža (Cotinuscoggygria) - sem. Sumach, Anacardiaceae- rozkonárený ker

Chemické zloženie liečivých rastlinných surovín. 0,2% esenciálny olej(prevláda myrcén), ~ 25 % tanínu, flavonoidy.

Hlavné pôsobenie lieku: adstringentný, dezinfekčný prostriedok.

Povaha aplikácie... sa používajú na priemyselnú výrobu tanínu a jeho prípravkov, ako aj prípravku Flacumin, čo je súhrn flavonolových aglykónov z listov sumpie a má choleretický účinok.

FoliaRhuscoriariae – Listy opaľovania Sumach.

Sumach opaľovanie (Rhuscoriariae) - sem. Sumach, Anacardiaceae- krík

Chemické zloženie liečivých rastlinných surovín... triesloviny (25 %, prevažuje tanín), flavonoidy (2,5 % - deriváty kvercitínu, myricetínu, kempferolu), kyseliny galová a ellagová.

Hlavné pôsobenie lieku: adstringentný, dezinfekčný prostriedok.

Povaha aplikácie... sa používajú na priemyselnú výrobu tanínu a jeho prípravkov používaných pri liečbe zápalové procesyústno-nosnú dutinu výplachom 2% vodou alebo vodno-glycerínovým roztokom, vredy, rany a popáleniny pomocou lubrikácie 3-10% roztokmi a masťami.

Rhizomata Bergeniaecrassifoliae - oddenky badanu hrubolisté.

Badan hrubolistý (Bergeniacrassifolia) - sem. lomikameň, Saxifragaceae- dlhý termín bylinná rastlina

Chemické zloženie liečivých rastlinných surovín: taníny (~ 27%, z toho tanín - 8-10%), kyselina galová, arbutín (do 22%), voľný hydrochinón (2-4%), kumaríny, živice, vitamín C, cukor,

Povaha aplikácie... Nálev a odvar z koreňov a odnoží badanu sa používa v gynekológii, stomatológii na zastavenie krvácania a ako protizápalové, antiseptikum, na liečbu gastritídy a žalúdočných a dvanástnikových vredov, v. ľudová medicína- na liečbu pľúcnej tuberkulózy.

RhizomataetradicesSanguisorbae -podzemky a korene Burnetu.

Burnet liečivý (Sangusorbaofficinalis) - sem. Rosaceae, Rosaceae- trváca bylina

Chemické zloženie LR: taníny, hlavne hydrolyzovateľné (12-20%), elagové, galové kyseliny, flavonoidy, antokyány, katechíny, saponíny.

Hlavné pôsobenie lieku: adstringentný, hemostatický.

Povaha aplikácie... Burnet oddenky a korene sa používajú vo forme odvaru a tekutý extrakt ako adstringens pre gastrointestinálne ochorenia, enterokolitídu, hnačku; ako hemostatikum na krvácanie z maternice a hemoroidov, hemoptýzu.

FructusAlni – Jelšové šišky (šišky).

FoliaAlniincanae – listy jelše sivej.

FoliaAlniglutinosa– listy čiernej jelše.

Jelša čierna(lepkavý) (Alnusglutinosa), O. sivá (Alnusincana) - sem. breza, Betulaceae- stromy alebo veľké kríky.

Chemické zloženie liečivých rastlinných surovín: sadenice jelše obsahujú triesloviny, kyselinu galovú (až 4%), flavonoidy. V listoch o. šedá a asi. čierna obsahuje flavonoidy.

Hlavné pôsobenie lieku: adstringentný, dezinfekčný, protizápalový.

Povaha aplikácie... Odvar a nálev sa užívajú perorálne pri akútnej a chronickej enteritíde, kolitíde, dezinfekcii; zvonka - na výplachy hrdla, úst.

B. Väčšinou kondenzované:

CorticesQuerques–Dubová kôra.

Dub obyčajný(Querqustrobur) - sem. buk, Fagaceae- mocný strom

Chemické zloženie liečivých rastlinných surovín: taníny (10-20%, hydrolyzovateľné a kondenzované), gallová, elagové kyseliny, flavonoidy

Hlavné pôsobenie lieku: adstringentný, antibakteriálny.

Povaha aplikácie... vo forme odvaru a nálevu ako vonkajšie adstringentné a protizápalové činidlo na liečbu stomatitídy, zápalu ďasien, zápalu ústna dutina, ženské pohlavné orgány, popáleniny kože, potenie.

RhizomataTormentillae – vzpriamené podzemky cinquefoil.

Mochna vzpriamená– Potentillaerecta- toto. Rosaceae, Rosaceae- trváca bylina

Chemické zloženie liečivých rastlinných surovín... taníny (15-30%: prevládajú kondenzované taníny), antokyány, katechíny.

Hlavné pôsobenie lieku

Povaha aplikácie... Odvar a nálev sa užívajú vnútorne ako sťahujúci a protizápalový prostriedok pri zápalových stavoch ústnej dutiny a hrtana, pri poruchách tráviaceho traktu, zvonka pri ekzémoch.

Fructus Vaccinium mirtilli - ovocné stromy.

Cormi Vaccinii mytilli - utečenci.

Čučoriedka obyčajná (Vaccinium myrtillus L.) - Heather, Ericaceae- malý krík

Chemické zloženie liečivých rastlinných surovín... taníny (18-20%), vrátane kondenzovaných (5-12%), flavonoidy (hyperín, rutín), antokyány.

Hlavné pôsobenie lieku: adstringentný, protizápalový.

Povaha aplikácie... častejšie vo forme nálevu, odvaru, želé v súvislosti s fermentačnými a hnilobnými procesmi v črevách, kolitída. Ukázalo sa, že čučoriedky zlepšujú prekrvenie očí, stabilizujú štruktúru sietnice a zlepšujú nočné videnie.

FructusPadi -čerešňové ovocie.

Čerešňa obyčajná (Padusavium), h) Ázijské (P. asiatica) - sem. Rosaceae, Rosaceae- strom vysoký do 10 m

Chemické zloženie liečivých rastlinných surovín: taníny (15%: väčšinou kondenzované), fenolkarboxylové a organické kyseliny, vitamín C, cukry, terpenoidné glykozidy

Hlavné pôsobenie lieku: adstringentný, dezinfekčný prostriedok.

Povaha aplikácie... Odvar a nálev sa používajú ako adstringens a dezinfekcia tráviaceho traktu: pri úplavici, hnačke. Plody čerešne vtáčej sú súčasťou žalúdočných nábojov.

Držitelia patentu RU 2439568:

Vynález sa týka oblasti farmakológie a môže sa použiť na stanovenie tanínov v rastlinných materiáloch. Metóda stanovenia tanínov v rastlinných surovinách spočíva v tom, že vzorka surovín sa pri varení extrahuje vodou, ochladí, prefiltruje, meria sa optická hustota alikvotnej vzorky pri vlnovej dĺžke 277 nm a obsah súčet všetkých tanínov sa vypočíta podľa určitého vzorca, potom sa do alikvotnej vzorky filtrátu pridá 1% roztok kolagénu v 1% kyseline octovej, pretrepe, prefiltruje, zmeria sa optická hustota filtrátu pri vlnovej dĺžke 277 nm a vypočíta sa obsah vyzrážaných tanínov podľa určitého vzorca. Metóda zlepšuje presnosť stanovenia obsahu tanínov v rastlinných surovinách a selektívne stanovuje zrážané a nezrážané triesloviny v rastlinných surovinách.

Vynález sa týka chemicko-farmaceutického priemyslu, oblasti farmakognózie a farmaceutickej chémie a možno ho použiť na kontrolu kvality rastlinných surovín s obsahom trieslovín.

Známa metóda stanovenia tanínov v liečivých rastlinných surovinách (HP) metódou coulometrie z hľadiska tanínu (SG Abdullina et al. Coulometrické stanovenie tanínov v liečivých rastlinných surovinách. // Lekáreň. č. 4. - 2010. - str. 13 - 15).

Nevýhodou tejto metódy je použitie prídavného zariadenia (coulometer), špecifického titračného činidla (hypojodid draselný), ktorý sa svojimi oxidačnými vlastnosťami približuje manganistanu draselnému a neumožňuje rozlíšiť vysokomolekulárne a nízkomolekulárne taníny.

Známa je aj metóda na stanovenie obsahu tanínu a derivátov kyseliny galovej v čaji pomocou konduktometrie (Patent č. 2127878. Metóda na samostatné stanovenie tanínu a katechínov (v zmysle kyseliny galovej) v čaji. M.: 1999) .

Nevýhodou tejto metódy je použitie toxických organických rozpúšťadiel (izobutylalkohol), ako aj použitie farebnej reakcie s Fe (III), ktorej produktom je farebne nestála farebne časovo nestála farebná zlúčenina.

Známa je aj metóda kvantitatívneho stanovenia tanínov z hľadiska tanínu v listoch sumpie a sumachu komplexometrickou metódou po vyzrážaní tanínov soľami zinku (GOST 4564-79. List sumpie. Špecifikácie; GOST 4565-79. Sumach list. Špecifikácie).

Nevýhodou tejto metódy je trvanie analýzy a náročnosť určenia bodu ekvivalencie.

Známa je aj metóda na kvantitatívne stanovenie tanínov spektrofotometrickou metódou po reakcii s Folinovým-Chocalteuovým činidlom z hľadiska kyseliny galovej (Smernice pre metódy kontroly kvality a bezpečnosti biologicky aktívnych potravinárskych prísad. Návod. P 4.1. 1672 - 03. - M. - 2004. - str. 94 - 95).

Nevýhoda túto metódu je nemožnosť samostatného stanovenia tanínov s nízkou a vysokou molekulovou hmotnosťou.

Najbližšie k navrhovanej metóde je, že taníny sa stanovujú spektrofotometriou z hľadiska kyseliny galovej (Smernice pre metódy kontroly kvality a bezpečnosť biologicky aktívnych potravinárskych prísad. Smernica. R 4.1.1672-03. - M. - 2004 - s. 120 ).

Nevýhodou tejto metódy je opakované riedenie testovanej vzorky, v dôsledku čoho sa zle stanovuje koncentrácia tanínov v roztoku. Pri tejto metóde je tiež referenčným roztokom tlmivý roztok, čo komplikuje analýzu. Okrem toho táto metóda neumožňuje oddelene stanoviť obsah tanínov s nízkou a vysokou molekulovou hmotnosťou.

Cieľom vynálezu je zlepšiť presnosť stanovenia tanínov a možnosť oddeleného stanovenia zrážaných a nezrážaných tanínov v rastlinných surovinách.

Problém je vyriešený tým, že vzorka surovín sa pri varení extrahuje vodou, ochladí, prefiltruje, meria sa optická hustota alikvotnej vzorky pri vlnovej dĺžke 277 nm a obsah súčtu všetkých tanínov vypočítané pomocou vzorca

50 - objem banky, ml,

W - vlhkosť surovín,%,

K alikvotnej vzorke filtrátu sa pridá 1 % roztok kolagénu v 1 % kyseline octovej, pretrepe sa, prefiltruje, meria sa optická hustota filtrátu pri vlnovej dĺžke 277 nm a obsah vyzrážaných tanínov sa vypočíta podľa vzorca

D 1 - optická hustota roztoku 1,

D 2 - optická hustota roztoku 2,

m nav - hmotnosť vzorky suroviny, g,

Va je objem alikvotnej vzorky, ml,

250 - celkový extrakčný objem, ml,

50 - objem banky, ml,

508 - špecifický absorpčný index kyseliny galovej (optická hustota 1% roztoku kyseliny galovej 1 mg/ml),

W - vlhkosť surovín,%.

V praxi sa spôsob uskutočňuje nasledovne. Asi 2,0 (presne odvážené) rozdrvenej suroviny preosiatej cez sito s priemerom otvoru 3 mm sa vloží do banky s objemom 500 ml, zaleje sa 250 ml vody zohriatej do varu a varí sa 30 minút pod spätným chladičom za občasného miešania. Ochladí sa na izbovú teplotu, doplní vodou na 250 ml, prefiltruje cez vatu, aby sa častice suroviny nedostali do vodného výluhu. Prvých 50 ml filtrátu zlikvidujte.

1-4 ml vodného extraktu sa vloží do odmernej banky s objemom 50 ml, doplní sa po značku vodou (roztok 1). Optická hustota roztoku 1 sa meria pri vlnovej dĺžke 277 nm. Na porovnanie sa používa voda.

30 ml vodného extraktu sa umiestni do odmernej nádoby s objemom 50 ml, pridá sa 2-10 ml zrážacieho činidla, pretrepáva sa 30-60 minút, usadzuje sa, prefiltruje sa. 1-4 ml získaného filtrátu sa prenesie do banky s objemom 50 ml, doplní sa po značku vodou (roztok 2). Optická hustota roztoku 2 sa meria pri vlnovej dĺžke 277 nm. Na porovnanie sa používa voda.

Vynález je ilustrovaný nasledujúcimi príkladmi.

Príklad 1. Na analýzu sa odobrala rastlinná surovina - dubová kôra.

Asi 2,0 (presne odváženej) drvenej surovej dubovej kôry preosiatej cez sitko s priemerom otvoru 3 mm sa vloží do banky s objemom 500 ml, zaleje sa 250 ml vody zohriatej do varu a varí sa 30 minút pod spätným chladičom za občasného miešania. Ochladí sa na izbovú teplotu, doplní vodou na 250 ml, prefiltruje cez vatu, aby sa častice suroviny nedostali do vodného výluhu. Prvých 50 ml filtrátu zlikvidujte.

2 ml vodného extraktu z dubovej kôry sa naleje do odmernej banky s objemom 50 ml, doplní sa po značku vodou (roztok 1). Optická hustota roztoku 1 sa meria pri vlnovej dĺžke 277 nm. Na porovnanie sa používa voda. D 1 pre dubovú kôru je 0,595.

30 ml vodného extraktu sa vloží do odmerky s objemom 50 ml, pridá sa 2 ml zrážacieho činidla, pretrepáva sa 30 minút, usadzuje sa, prefiltruje sa. 2 ml získaného filtrátu sa prenesie do banky s objemom 50 ml, doplní sa po značku vodou (roztok 2). Optická hustota roztoku 2 sa meria pri vlnovej dĺžke 277 nm. Na porovnanie sa používa voda. D 2 pre dubovú kôru je 0,276.

Príklad 2. Na analýzu sa odobral rastlinný materiál odnoží špirály.

Do banky s objemom 500 ml sa vložia asi 2,0 (presne odvážené) rozdrvenej suroviny podzemku špirálky preosiatej cez sito s priemerom otvoru 3 mm, zalejú sa 250 ml vody zohriatej do varu a varí sa 30 minút pod spätným chladičom za občasného miešania. Ochladí sa na izbovú teplotu, doplní vodou na 250 ml, prefiltruje cez vatu, aby sa častice suroviny nedostali do vodného výluhu. Prvých 50 ml filtrátu zlikvidujte.

1 ml vodného extraktu z podzemku špirály sa vloží do odmernej banky s objemom 50 ml, doplní sa po značku vodou (roztok 1). Optická hustota roztoku 1 sa meria pri vlnovej dĺžke 277 nm. Na porovnanie sa používa voda.

30 ml vodného extraktu sa vloží do odmerky s objemom 50 ml, pridá sa 7 ml zrážacieho činidla, pretrepáva sa 60 minút, usadí sa, prefiltruje sa. 1 ml získaného filtrátu sa prenesie do banky s objemom 50 ml, doplní sa po značku vodou (roztok 2). Optická hustota roztoku 2 sa meria pri vlnovej dĺžke 277 nm. Na porovnanie sa používa voda.

Navrhovaná metóda zlepšuje presnosť stanovenia obsahu tanínov v rastlinných surovinách a selektívne stanovuje zrážané a nezrážané triesloviny v rastlinných surovinách.

Metóda stanovenia tanínov v rastlinných surovinách z hľadiska kyseliny galovej, ktorá spočíva v tom, že vzorka surovín sa pri varení extrahuje vodou, ochladí, prefiltruje, meria sa optická hustota alikvotnej vzorky pri vlnovej dĺžke 277 nm a obsah súčtu všetkých tanínov sa vypočíta podľa vzorca:

kde x a - obsah súčtu tanínov v kyseline galovej, %;

50 - objem banky, ml;
508 - špecifická rýchlosť absorpcie kyseliny galovej (optická hustota 1% roztoku kyseliny galovej 1 mg / ml);
W - vlhkosť surovín,%,
k alikvotnej vzorke filtrátu sa pridá 1% roztok kolagénu v 1% kyseline octovej, pretrepe sa, prefiltruje, zmeria sa optická hustota filtrátu pri vlnovej dĺžke 277 nm a obsah vyzrážaných tanínov sa vypočíta pomocou vzorec:

kde X je obsah vyzrážaných tanínov v kyseline galovej, %;
D 1 - optická hustota roztoku 1;
D 2 - optická hustota roztoku 2;
m nav - hmotnosť vzorky surovín, g;
Va je objem alikvotnej vzorky, ml;
250 - celkový extrakčný objem, ml;
50 - objem banky, ml;
508 - špecifická rýchlosť absorpcie kyseliny galovej (optická hustota 1% roztoku kyseliny galovej 1 mg / ml);
W - vlhkosť surovín,%.

Podobné patenty:

Vynález sa týka medicíny, menovite psychoneurológie, a opisuje spôsob predpovedania obnovy neurologických funkcií u pacientov v akútnom období ischemickej cievnej mozgovej príhody uskutočňovaním klinických a biochemických štúdií celkovej koncentrácie albumínu (OCA) v sére v g/ l, kde sa dodatočne do 5. až 7. dňa choroby stanoví efektívna koncentrácia albumínu (ECA), vypočíta sa rezerva väzby albumínu (PCA) a ak je tento ukazovateľ menší ako jedna, predpovedá sa negatívny výsledok obnovenie neurologických funkcií u pacientov v akútnom období ischemickej cievnej mozgovej príhody.

Vynález sa týka medicíny, biologického výskumu v onkológii a možno ho použiť na určenie vývoja malígneho procesu pri nádoroch mozgu po chirurgickej liečbe.

Vynález sa týka medicíny, konkrétne onkológie, a opisuje spôsob hodnotenia účinnosti neoadjuvantnej chemoterapie pri rakovine. močového mechúra vyšetrením pacienta, pri ktorom je zaznamenaná maximálna intenzita autofluorescencie nádorových tkanív v zelenej oblasti spektra v štádiu primárnej diagnózy a 1 mesiac po predoperačnej chemoterapii a kedy sú hodnoty maximálnej intenzity autofluorescencie pacienta nárast nádorového tkaniva o 15 % od počiatočnej a väčšia účinnosť liečby sa hodnotí ako čiastočná regresia nádorového procesu, pri absencii zmien v indexoch intenzity autofluorescencie nádorového tkaniva od počiatočných je stabilizácia je stanovený proces, s poklesom indexov intenzity autofluorescencie nádorového tkaniva o 15% alebo viac od počiatočných, je zaznamenaná progresia nádorového procesu.

1.Styasnyho reakcia - so 40% roztokom formaldehydu a konc. HCl -

Kondenzované taníny tvoria tehlovočervenú zrazeninu

2.Brómová voda (5 g brómu v 1 l vody) - brómovú vodu pridávajte po kvapkách do 2-3 ml skúšobného roztoku, kým sa v roztoku neobjaví zápach brómu; v prípade prítomnosti kondenzované opaľovanie olových látok vzniká oranžová alebo žltá zrazenina.

3. Farbenie s železité soli, železo-amónny kamenec -

čierna a modrá(taníny hydrolyzovateľnej skupiny, čo sú deriváty pyrogallolu)

alebo čierno-zelená ( kondenzované skupinové taníny, čo sú deriváty pyrokatecholu).

4.Katechíny dať červené sfarbenie s vanilínom

(v prítomnosti koncentrovanej HCl alebo 70 % H 2 SO 4 vzniká jasne červená farba).

Pri tejto reakcii tvoria katechíny farebný produkt nasledujúcej štruktúry:

Reakcia, ktorá odlišuje pyrogalické tannidy od pyrokatecholu, je reakcia s nitrózometyluretánom.

Pri varení roztokov tanínov s nitrózometyluretánom sa pyrokatecholové tannidy úplne vyzrážajú,

a prítomnosť pyrogalických tanidov sa dá vo filtráte zistiť pridaním železno-amonného kamenca a octanu sodného - filtrát sa sfarbí do fialova.

Voľná kyselina ellagová po pridaní niekoľkých kryštálov dusitanu sodného a troch až štyroch kvapiek kyseliny octovej získa červenofialovú farbu.

7. Na detekciu viazaná kyselina ellagová (alebo gaxaoxidifénová) kyselina octová sa nahradí 0,1 N. kyselina sírová alebo chlorovodíková (karmínovo-červená farba, prechádzajúca do modrej).

8. Triesloviny s bielkovinami vytvoriť vodonepriepustný film (opaľovanie). Tým, že spôsobujú čiastočnú koaguláciu bielkovín, vytvárajú ochranný film na slizniciach a povrchu rany.

9. Pri kontakte so vzduchom (napr. rezanie čerstvých podzemkov) triesloviny ľahko oxiduje , meniace sa na flobafény alebo sčervenanie, ktoré určujú tmavohnedú farbu mnohých kôr a iných orgánov, infúzií.

flobafény nerozpustný v studená voda rozpustiť sa v horúca voda, farbiace odvary a nálev hnedá.

10.C 10% roztok stredného octanu olovnatého (súčasne sa pridá 10% roztok kyseliny octovej):

vzniká biela zrazenina nerozpustná v kyseline octovej – triesloviny hydrolyzovateľná skupina

(zrazenina sa odfiltruje a obsah kondenzované taníny, s 1% roztokom železo-amónneho kamenca - čierno-zelené sfarbenie);

biely sediment, rozpustný v kyseline octovej - kondenzované skupinové taníny.

11. Na identifikáciu jednotlivých zlúčenín použite chromatografická analýza prezeranie v UV svetle. Chromatogramy sa spracovávajú roztokom chloridu železitého alebo vanilínového činidla

Štruktúra je stanovená pomocou IR spektier, PMR spektier.

Reakcia s 1% alkoholovým roztokom kamenca amónneho železa je liekopisná , vykonávané s odvarom surovín - dubová kôra, hadí podzemok, plody jelše, plody čučoriedok;

A tiež priamo v suchých surovinách - dubová kôra, kalina kôra, podzemky badanu.

Kvantifikácia.

1. Gravimetrické alebo váhové metódy - založené na kvantitatívnom vyzrážaní tanínov želatínou, iónmi ťažkých kovov alebo adsorpciou kožným (gélovým) práškom.

Oficiálna v garbiarskom a ťažobnom priemysle je metóda jednej hmotnosti (BEM):

Vo vodných extraktoch z rastlinného materiálu sa najprv stanoví celkové množstvo rozpustných látok (sušina) vysušením určitého objemu extraktu do konštantnej hmotnosti;

potom sa triesloviny z kukly ošetria beztukovým koženým práškom; po oddelení zrazeniny vo filtráte sa množstvo suchého zvyšku opäť nastaví.

Rozdiel v hmotnosti sušiny pred a po úprave extraktu koženým púdrom ukazuje na množstvo pravých tanínov.

2. Titrimetrické metódy.

Tie obsahujú:

1) Želatínová metóda - Metóda Yakimova a Kurnitskaja- založený na schopnosti tanínov vytvárať nerozpustné komplexy s bielkovinami. Vodné extrakty zo surovín sa titrujú 1% roztokom želatíny, v bode ekvivalencie sa komplexy želatína-tanát rozpustia v nadbytku činidla.

Titer je založený na čistom taníne. Bod valencie sa určí tak, že sa odoberie najmenší objem titrovaného roztoku, ktorý spôsobí úplné vyzrážanie tanínov.

Metóda najpresnejšie odkedy umožňuje určiť množstvo pravých tanínov.

Nevýhody: trvanie definície a náročnosť stanovenia bodu ekvivalencie.

2) Manganatometrická metóda (Leventhalova metóda upravená Kursanovom). Ide o liekopisnú metódu založenú na oxidovateľnosti svetlom. manganistan draselný v kyslom prostredí za prítomnosti indikátora a katalyzátora kyselina indigosulfónová, ktorá sa v bode ekvivalencie roztoku mení z modrej na zlatožltú.

Špecifiká stanovenia, ktoré umožňujú titrovať iba makromolekuly tanínov: titrácia sa vykonáva vo vysoko zriedených roztokoch (extrakcia sa riedi 20x) pri izbovej teplote v kyslom prostredí, za intenzívneho miešania sa pomaly po kvapkách pridáva manganistan.

Metóda je ekonomická, rýchla, jednoduchá na vykonanie, ale nie dostatočne presná, pretože manganistan draselný čiastočne oxiduje fenolové zlúčeniny s nízkou molekulovou hmotnosťou.

3) Na kvantitatívne stanovenie tanínu v listoch sumachu a spodina používa sa metóda zrážania tanínov síranom zinočnatým a následne komplexometrická titrácia Trilon B v prítomnosti xylenolovej oranže.

Fyzikálno-chemické metódy.

1) Fotoelektrické kolorimetrické - na základe schopnosti DV vytvárať farebné zlúčeniny s železitými soľami, kyselinou fosforečnou a volfrámovou, Folin-Denisovým činidlom atď.

2) Chromatospektrofotometrické a nefelometrické metódy sa používajú vo vedeckom výskume.

Katedra manažmentu a ekonomiky farmácie, farmaceutickej technológie a farmakognózie

ABSOLVENTSKÁ KVALIFIKAČNÁ PRÁCA

Na tému POROVNÁVACIE CHARAKTERISTIKY ČERSTVOM ZBERANÝCH A HOTOVÝCH LEKÁRSKYCH BYLINNÝCH SUROVÍN OBSAHUJÚCICH OPALOVACIE LÁTKY

Zoznam skratiek

ÚVOD

KAPITOLA 1. OPAĽOVACIE LÁTKY

2. 1. Predmety výskumu

KAPITOLA 3. POROVNÁVACIA ANALÝZA OBSAHU opaľovacích LÁTOK V ČERSTVÝCH ZBERANÝCH A HOTOVÝCH DROGÁCH

RASTLINNÉ SUROVINY

Bibliografia

ZOZNAM SKRATIEK

BP - krvný tlak

BUV - butanol-kyselina octová-voda

BEM - metóda jednej hmotnosti

GSO - štátna štandardná vzorka

GF - Štátny liekopis

konc. - koncentrovaný

LS - liek

LP - liečivý prípravok

LRS - liečivé bylinné suroviny

ND - regulačná dokumentácia

UV lúče - ultrafialové lúče

ÚVOD

Taníny sú skupinou rôznorodého a komplexného zloženia vo vode rozpustných organických látok aromatického radu, obsahujúcich hydroxylové radikály fenolovej povahy.

Taníny sú rozšírené v rastlinnej ríši a majú charakteristickú sťahujúcu chuť. Liečivé rastliny obsahujúce triesloviny sú bežné vo Voronežskej oblasti.

V súčasnosti sa suroviny a prípravky s obsahom trieslovín používajú zvonka aj vnútorne ako adstringentné, protizápalové, baktericídne a hemostatické prostriedky. Pôsobenie je založené na schopnosti tanínov viazať sa na bielkoviny za vzniku hustých albuminátov.

Relevantnosť témy je vysvetlená skutočnosťou, že obsah tanínov v hotovej lieky(MP) a hotových liečivých rastlinných surovín (MP) je často menej ako v čerstvo zozbieraných surovinách. Ich obsah je ovplyvnený veľkým množstvom faktorov, akými sú podmienky zberu a sušenia, skladovanie samotnej suroviny a hotovej drogy.

Cieľom diplomovej práce bolo študovať liečivé rastlinné materiály s obsahom trieslovín rastúcich v oblasti Voronež.

Na dosiahnutie tohto cieľa je potrebné vyriešiť nasledujúce úlohy:

Študovať teoretické základy pojmu taníny;

Študovať liečivé rastliny voronežskej oblasti obsahujúce taníny;

Analyzovať obsah trieslovín v čerstvo zozbieraných a hotových liečivých rastlinných surovinách.

Predmetom štúdie bol čerstvo zozbieraný a pripravený MP dvoch druhov rastlín rastúcich v oblasti Voronež: dub obyčajný (Quercus robur) a trojčlenná sukcesia (Bidens tripartita).

Na stanovenie kvantitatívneho obsahu tanínov v surovine bola použitá metóda spektrofotometrie.

Výskum bol realizovaný na základe Voronežskej štátnej lekárskej akadémie, na Katedre manažmentu a ekonomiky farmácie, farmaceutickej technológie a farmakognózie.

KAPITOLA 1. OPAĽOVACIE LÁTKY

1. 1. Všeobecná koncepcia tanínov a ich rozdelenie

Taníny (taníny) sú rastlinné polyfenolické zlúčeniny s molekulová hmotnosť od 500 do 3000, schopné vytvárať silné väzby s proteínmi a alkaloidmi a majú opaľovacie vlastnosti.

Sú tak pomenované pre svoju schopnosť opaľovať neošetrenú kožu zvierat a premieňať ju na odolnú kožu, odolnú voči vlhkosti a mikroorganizmom, enzýmom, to znamená, že nepodlieha rozkladu.

Táto schopnosť tanínov je založená na ich interakcii s kolagénom (proteín kože), čo vedie k vytvoreniu stabilnej zosieťovanej štruktúry - pokožky v dôsledku výskytu vodíkových väzieb medzi molekulami kolagénu a fenolickými hydroxylmi tanínov.

Ale tieto väzby sa môžu vytvoriť, keď sú molekuly dostatočne veľké na to, aby pripojili susedné kolagénové reťazce a majú dostatok fenolových skupín na zosieťovanie.

Polyfenolové zlúčeniny s nižšou molekulovou hmotnosťou (menej ako 500) sa adsorbujú len na bielkoviny a nie sú schopné vytvárať stabilné komplexy, nepoužívajú sa ako triesloviny.

Polyfenoly s vysokou molekulovou hmotnosťou (s molekulovou hmotnosťou vyššou ako 3000) tiež nie sú opaľovacími činidlami, pretože ich molekuly sú príliš veľké a neprenikajú medzi kolagénové vlákna.

Stupeň opálenia závisí od povahy mostíkov medzi aromatickými jadrami, t. j. od štruktúry samotného tanínu a od orientácie molekuly tanidu vo vzťahu k polypeptidovým reťazcom proteínu.

Keď je tannid rovinný, na molekule proteínu sa objavia stabilné vodíkové väzby:

Sila spojenia tanidov s proteínom závisí od počtu vodíkových väzieb a od molekulovej hmotnosti.

Najspoľahlivejším indikátorom prítomnosti tanínov v rastlinných extraktoch je nevratná adsorpcia tanínov na kožný (goliášsky) prášok a vyzrážanie želatíny z vodných roztokov.

Pojem „taníny“ prvýkrát použil v roku 1796 francúzsky výskumník Seguin na označenie látok prítomných v extraktoch určitých rastlín, ktoré sú schopné vykonávať proces opaľovania. Praktické otázky garbiarsky priemysel položil základ pre štúdium chémie tanínov.

Iný názov pre triesloviny – „tanidy“ – pochádza z latinizovanej podoby keltského názvu pre dub – „tan“, ktorého kôra sa oddávna používala na spracovanie koží.

Prvý vedecký výskum v oblasti chémie tanínov sa datuje do druhej polovice 18. storočia.

Prvým publikovaným dielom je práca Gledicha z roku 1754 „O použití čučoriedok ako suroviny na výrobu trieslovín“. Prvou monografiou bola Deckerova monografia z roku 1913, ktorá zhrnula všetok nahromadený materiál o trieslovinách.

Mená najväčších zahraničných chemikov sú spojené so štúdiami štruktúry tanínov: G. Procter, E. Fischer, K. Freudenberg, P. Carrer.

Taníny sú deriváty pyrogallolu, pyrokatecholu, floroglucinolu. Jednoduché fenoly nemajú opaľovací účinok, ale spolu s fenolkarboxylovými kyselinami sprevádzajú taníny.

V prírode mnohé rastliny (najmä dvojklíčnolistové) obsahujú triesloviny. Medzi nižšími rastlinami sa nachádzajú v lišajníkoch, hubách, riasach, medzi výtrusnými rastlinami - v machoch, prasličkách, paprade. Zástupcovia čeľadí borovica, vŕba, pohánka, vres, buk, sumach sú bohatí na triesloviny.

Čeľade rosaceae, strukovín a myrty majú početné rody a druhy, v ktorých obsah trieslovín dosahuje 20-30% a viac. Najviac (až 50 – 70 %) trieslovín sa nachádza v patologických útvaroch – hálkach. Najbohatšie na triesloviny sú tropické rastliny.

Dub, cinquefoil, hadec, spála, bergus hrubolistý, skumpia garbiarska, ako aj mnohé iné rastliny obsahujú triesloviny zmiešanej skupiny - kondenzované a hydrolyzované.

Taníny sa nachádzajú v podzemných a nadzemných častiach rastlín: hromadia sa v bunkovej šťave. V listoch sa triesloviny alebo taníny nachádzajú v bunkách epidermy a parenchýmu obklopujúcich cievne zväzky a žily, v podzemkoch a koreňoch - hromadia sa v parenchýme kôry a drene.

1. 2. Klasifikácia tanínov

Taníny sú vďaka svojej rozmanitosti zmesou rôznych polyfenolov chemické zloženie klasifikácia je náročná.

Podľa Procterovej klasifikácie (1894) sa taníny v závislosti od povahy ich rozkladných produktov pri teplote 180-200 0 С (bez prístupu vzduchu) delia do dvoch hlavných skupín:

1.pyrogallovye (pri rozklade podávať pyrogallol);

2.pyrokatechol (tvorí sa pyrokatechol) (tabuľka 1)

V dôsledku ďalšieho výskumu chémie tanínov Freudenberg v roku 1933 spresnil Procterovu klasifikáciu a odporučil označiť prvú skupinu (pyrogalické taníny) ako hydrolyzovateľné taníny a druhú (pyrokatecholové taníny) - kondenzované.

Väčšinu tanínov rastlín nemožno jednoznačne priradiť k typu hydrolyzovateľných alebo kondenzovaných, pretože v mnohých prípadoch nie sú tieto skupiny výrazne diferencované.

Rastliny často obsahujú zmes oboch tanínov.

V súčasnosti sa najčastejšie používa Freudenbergova klasifikácia, ktorá rozlišuje 2 hlavné skupiny:

1. Hydrolyzovateľné taníny:

Gallotaníny - estery kyseliny galovej a cukrov;

Nesacharidové estery fenolkarboxylových kyselín;

Ellagitaníny sú estery kyseliny ellagovej a cukrov.

2. Kondenzované taníny:

deriváty flavanolu - 3;

Deriváty flavandiolov - 3, 4;

Deriváty oxystilbénov.

1. 3. Metóda stanovenia kvalitatívneho a kvantitatívneho obsahu tanínov v liečivých rastlinných surovinách

Reakcie na zistenie trieslovín:

Špecifickou reakciou na taníny je precipitačná reakcia želatíny. Použite 1% roztok želatíny v 10% roztoku chloridu sodného. Objaví sa vločkovitá zrazenina, rozpustná v nadbytku želatíny. Negatívna reakcia so želatínou naznačuje neprítomnosť trieslovín.

Reakcia so soľami alkaloidov. Amorfná zrazenina vzniká v dôsledku tvorby vodíkových väzieb s hydroxylovými skupinami tanínov a atómami dusíka alkaloidu.

Tieto reakcie poskytujú rovnaký výsledok bez ohľadu na skupinu tanínov.

Reakcie na určenie skupiny tanínov:

Stiasni reakcia - so 40% roztokom formaldehydu a konc. HCl - Kondenzované taníny tvoria tehlovočervenú zrazeninu

Brómová voda (5 g brómu v 1 l vody) - brómovú vodu pridávajte po kvapkách do 2-3 ml skúšobného roztoku, kým sa v roztoku neobjaví zápach brómu; v prítomnosti kondenzovaných tanínov vzniká oranžová alebo žltá zrazenina.

Farbenie železitými soľami, železo-amónny kamenec - čierno-modré (taníny hydrolyzovateľnej skupiny, čo sú deriváty pyrogallolu) alebo čiernozelené (taníny kondenzovanej skupiny, čo sú deriváty pyrokatecholu).

Katechíny dávajú s vanilínom červenú farbu (v prítomnosti koncentrovanej HCl alebo 70 % H 2 SO 4 vzniká jasne červená farba).

Pri tejto reakcii tvoria katechíny farebný produkt nasledujúcej štruktúry:

Kvantifikácia.

1) Gravimetrické alebo gravimetrické metódy - založené na kvantitatívnom vyzrážaní tanínov želatínou, iónmi ťažkých kovov alebo adsorpciou kožným (gélovým) práškom.

Oficiálnou metódou v garbiarskom a ťažobnom priemysle je metóda jednej hmotnosti (BEM):

Vo vodných extraktoch z rastlinného materiálu sa najprv stanoví celkové množstvo rozpustných látok (sušina) vysušením určitého objemu extraktu do konštantnej hmotnosti; potom sa triesloviny z kukly ošetria beztukovým koženým práškom; po oddelení zrazeniny vo filtráte sa množstvo suchého zvyšku opäť nastaví. Rozdiel v hmotnosti sušiny pred a po úprave extraktu koženým púdrom ukazuje na množstvo pravých tanínov.

2) Titračné metódy

Želatínová metóda - Yakimovova a Kurnitskaja metóda - je založená na schopnosti tanínov vytvárať nerozpustné komplexy s proteínmi. Vodné extrakty zo surovín sa titrujú 1% roztokom želatíny, v bode ekvivalencie sa komplexy želatína-tanát rozpustia v nadbytku činidla. Titer je založený na čistom taníne. Bod valencie sa určí tak, že sa odoberie najmenší objem titrovaného roztoku, ktorý spôsobí úplné vyzrážanie tanínov.

Metóda je najpresnejšia, pretože vám umožňuje určiť množstvo skutočných tanínov.

Nevýhody: trvanie definície a obtiažnosť stanovenia bodu ekvivalencie.

Permanganatometrická metóda (Leventhalova metóda modifikovaná Kursanovom). Táto liekopisná metóda je založená na ľahkej oxidácii manganistanom draselným v kyslom prostredí za prítomnosti indikátora a katalyzátora kyseliny indigosulfónovej, ktorá sa v bode ekvivalencie roztoku mení z modrej na zlatožltú.

Metóda je ekonomická, rýchla, jednoduchá na vykonanie, ale nie dostatočne presná, pretože manganistan draselný čiastočne oxiduje fenolové zlúčeniny s nízkou molekulovou hmotnosťou.

3) Fyzikálne a chemické metódy

Fotoelektrická kolorimetrická metóda. Na základe schopnosti DV vytvárať farebné chemické zlúčeniny so železitými soľami, kyselinou fosforečnou a volfrámovou, Folin-Denisovým činidlom a inými látkami. Jedno z činidiel sa pridá do skúmaného extraktu z liečiva, po objavení sa stabilnej farby sa na fotokolorimetri zmeria optická hustota. Percento AI sa určí z kalibračného grafu vyneseného pomocou série tanínových roztokov so známou koncentráciou.

Spektrofotometrické stanovenie. Po prijatí vodného extraktu sa jeho časť odstreďuje 5 minút pri 3000 ot./min. Pridajte 2 % do centrifúgy vodný roztok molybdenan amónny, potom sa zriedi vodou a nechá sa 15 minút. Intenzita výslednej farby sa meria na spektrofotometri pri vlnovej dĺžke 420 nm v kyvete s hrúbkou vrstvy 10 mm. Výpočet tanidov sa vykonáva podľa štandardnej vzorky. SSS tanínu sa používa ako štandardná vzorka.

Chromatografické stanovenie. Na identifikáciu kondenzovaných tanínov sa získa alkohol (95 % etylalkohol) a vodné extrakty a vykoná sa papierová a tenkovrstvová chromatografia. GSO katechínu sa používa ako štandardná vzorka. Separácia sa uskutočňuje v rozpúšťadlových systémoch butanol - kyselina octová - voda (BUV) (40:12:28), (4:1:2), 5% kyselina octová na papieri Filtrak a doskách Silufol. Detekcia zón látok v chromatograme sa uskutočňuje v UV svetle, po ktorom nasleduje ošetrenie 1 % roztokom kamenca amónneho alebo 1 % roztokom vanilínu, koncentrovanou kyselinou chlorovodíkovou. V budúcnosti je možné vykonať kvantitatívnu analýzu elúciou z platne DV etylalkoholom a vykonať spektofotometrickú analýzu, pričom sa zaznamenáva absorpčné spektrum v rozsahu 250-420 nm.

Amperometrická metóda. Podstatou metódy je meranie elektrický prúd vznikajúce oxidáciou -OH skupín prírodných antioxidantov fenolovej povahy na povrchu pracovnej elektródy pri určitom potenciáli. Predbežne je zostrojená grafická závislosť signálu referenčnej vzorky (kvercetínu) od jej koncentrácie a pomocou získanej kalibrácie je vypočítaný obsah fenolov v testovaných vzorkách v jednotkách koncentrácie kvercetínu.

Potenciometrická titrácia. Tento typ titrácie extrakcie vody (najmä odvary z dubovej kôry) sa uskutočnil s roztokom manganistanu draselného (0,02 M), výsledky sa zaznamenali pomocou pH metra (pH-410). Koncový bod titrácie bol stanovený Granovou metódou pomocou počítačového programu „GRAN v. 0. 5". Potenciometrická titrácia poskytuje presnejšie výsledky, pretože bod ekvivalencie je jasne fixovaný, čo eliminuje skreslenie výsledkov spôsobené ľudskými faktormi. Potenciometrická titrácia titrácia je obzvlášť aktuálna v porovnaní s indikátorom pri štúdiu farebných roztokov, ako sú vodné extrakty obsahujúce triesloviny.

Coulometrická titrácia. Metóda kvantifikácie obsahu tanínov v liečivých rastlinných surovinách z hľadiska tanínu coulometrickou titráciou spočíva v tom, že skúmaný extrakt zo suroviny reaguje s coulometrickým titračným činidlom - hypojoditovými iónmi, ktoré vznikajú pri disproporcionácii elektrogenerovaného jódu v alkalickom prostredí. . Elektrická tvorba hypojoditových iónov sa uskutočňuje z 0,1 M roztoku jodidu draselného vo fosfátovom tlmivom roztoku (pH 9,8) na platinovej elektróde pri konštantnej sile prúdu 5,0 mA.

Na kvantitatívne stanovenie tanínov v liečivách sa teda používajú také metódy na kvantitatívne stanovenie tanínov v liečivách ako titračné (vrátane titrácie želatínou, manganistanom draselným, komplexometrickej titrácie trilonom B, potenciometrickej a coulometrickej titrácie), gravimetrické, fotoelektrokolorimetrické, spektrofotometrické, amperometrické metódy.

1. 4. Aplikácia tanínov

Z liečivých surovín obsahujúcich triesloviny sa získavajú prípravky používané ako adstringentné, hemostatické, protizápalové, antimikrobiálne látky. Ako antioxidant možno použiť suroviny obsahujúce kondenzované taníny. Okrem toho sa zistilo, že hydrolyzovateľné a kondenzované taníny vykazujú vysokú P-vitamínovú aktivitu, antihypoxický a antisklerotický účinok. Kondenzované taníny vykazujú protinádorový účinok, sú schopné uhasiť reťazové reakcie voľných radikálov, čo vysvetľuje ich určitú účinnosť pri chemoterapii rakoviny. Navyše v veľké dávky tanidy vykazujú protinádorový účinok, rádiosenzibilizačný účinok v stredných dávkach a antiradiačný účinok v malých dávkach.

Suroviny a prípravky s obsahom trieslovín sa používajú zvonka aj vnútorne ako adstringentné, protizápalové, baktericídne a hemostatické prostriedky. Pôsobenie je založené na schopnosti tanínov viazať sa na bielkoviny za vzniku hustých albuminátov.

Pri kontakte so zapálenou sliznicou alebo povrchom rany sa vytvorí tenký povrchový film, ktorý chráni citlivé nervové zakončenia pred podráždením. Existuje zhrubnutie bunkových membrán, zúženie cievy, uvoľňovanie exsudátov klesá, čo vedie k zníženiu zápalového procesu.

Pre schopnosť tanínov vytvárať zrazeniny s alkaloidmi, srdcovými glykozidmi a soľami ťažkých kovov sa používajú ako protijed pri otravách týmito látkami.

Navonok na choroby ústnej dutiny, hltana, hrtana (stomatitída, zápal ďasien, faryngitída, tonzilitída), ako aj na popáleniny, odvar z dubovej kôry, podzemky badanu, hadce, mochna, podzemky a korene horčiny a prípravok Používa sa „altán“.

Vnútri na choroby tráviaceho traktu (kolitída, enterokolitída, hnačka, úplavica) sú tanínové prípravky ("Tanalbin", "Tansal", "Altan", odvar z čučoriedok, čerešňa vtáčia (najmä v detskej praxi), plody jelše, podzemky badanu). hadec, Potentilla, podzemky a korene horca.

Ako hemostatiká na krvácanie z maternice, žalúdka a hemoroidov sa používajú odvary z kôry kaliny, podzemkov a koreňov horca, podzemkov potentilly a semenáčikov jelše.

Odvary sa pripravujú v pomere 1: 5 alebo 1: 10. Silne koncentrované odvary by sa nemali používať, pretože v tomto prípade albuminátový film vysychá, vznikajú trhliny a dochádza k sekundárnemu zápalovému procesu.

Protinádorový účinok trieslovín vodného extraktu z exokarpu plodov granátového jablka (na lymfosarkóm, sarkóm a iné choroby) a liečiva "Hanerol" získaného z kvetenstva pestreca obyčajného (Ivan-čaj) na rakovinu žalúdka a pľúc. bola experimentálne stanovená.

Taníny možno použiť ako protijed pri otravách glykozidmi, alkaloidmi a soľami ťažkých kovov.

KAPITOLA 2. OBJEKTY A METÓDY VÝSKUMU

2. 1. Predmety výskumu

Na území Voronežskej oblasti sa najčastejšie vyskytujú čeľade rastlín s obsahom trieslovín: Buk - Fagaceae, (dub letný - Quercus robur), Astral - Asteraceae (trojdielna postupnosť - Bidens tripartita), z čeľade ružovité - Rosaceae obyčajné - Padus avium), vŕba - Salicaceae (vŕba biela - Salix alba), muškáty - Geraniaceae (pelargónie lesné - Geranium sylvaticum) atď.

V tejto práci boli ako objekty štúdia vybrané liečivé rastliny ako dub obyčajný (Quercus robur) a trojramenný (Bidens tripartita).

1) Dub anglický (obyčajný) - Quercus robur L. (obr. 1) Použitá surovina je dubová kôra (Cortex Quercus).

Čeľaď bukovité - Fagaceae

Ryža. 1. Anglický dub

Botanická charakteristika. Anglický dub je strom vysoký až 40 m, so širokou, rozložitou korunou, kmeňom do priemeru 7 m a tmavohnedou kôrou. Listy obvajcovité, perovito laločnaté, s ovisnutými palistami, kožovité, hore lesklé, zospodu svetlozelené, krátko stopkaté; kvitnú neskôr ako mnohé druhy stromov. Dubové kvety začínajú vo veku 50 rokov. Kvitne súčasne s otváraním listov. Kvety sú jednopohlavné: samčie - v ovisnutých strapcoch, náušnice, samičie - sediace, po 1-2, s početnými šupinatými obalmi. Plodom je jednosemenný žaluď, sedí v plyuse na dlhej stopke. Voľne rastúce stromy prinášajú ovocie ročne, v lese po 4-8 rokoch. Kvitne v máji, plody dozrievajú v septembri.

Rozširovanie, šírenie. európskej časti krajiny. Na severe zasahuje do Petrohradu a Vologdy, východnou hranicou jej rozšírenia je Ural. Na Sibíri nerastie. Na Ďalekom východe, na Kryme a na Kaukaze sa nachádzajú iné druhy. Anglický dub je hlavným druhom listnatých lesov.

Habitat. V lesostepných a stepných zónach na juhovýchode tvorí lesy na povodiach a pozdĺž roklín. Zvyčajne rastie na hnojenej a vlhkej pôde, ale vyskytuje sa aj na dosť suchých pôdach. Niekedy tvorí rozsiahle dubové lesy.

Prázdne. Kôra sa zbiera skoro na jar, počas toku miazgy, keď sa ľahko oddeľuje od dreva, na poli rúbania z konárov a mladých kmeňov pred otvorením listov. Kmene starších stromov sú zvyčajne pokryté hrubým popraskaným korkom. Kôra takýchto stromov je nevhodná na zber. Mladá kôra obsahuje podstatne viac tanínov. Na odstránenie kôry sa urobia kruhové rezy nožom vo vzdialenosti 3035 cm od seba a potom sa spoja pozdĺžnymi rezmi. Odporúča sa hľadať dubové analógy.

Bezpečnostné opatrenia. Ťažba sa vykonáva s povolením lesného hospodárstva v osobitne určených oblastiach. Dub rastie pomaly.

Sušenie. V tieni, pod prístreškom alebo na dobre vetranom mieste. Je potrebné zabezpečiť, aby sa dažďová voda nedostala do surovín, pretože premočená kôra stráca značné množstvo tanínov. Pri sušení sa kôra prevráti; do večera ich prinesú do priestorov. Pred balením (kôra sa zviaže do trsov) sa preskúmajú vysušené suroviny, odstráni sa kôra so zvyškami dreva, pokrytá machom.

Vonkajšie znaky. Rúrkové drážkované kusy alebo úzke pásiky rôznych dĺžok, ale nie menej ako 3 cm, hrubé asi 2-3 mm, ale nie viac ako 6 mm. Vonkajší povrch kôry je svetlohnedý alebo svetlosivý, striebristý ("zrkadlový"), menej často matný, hladký alebo mierne zvrásnený, ale bez trhlín. Často sú viditeľné priečne pretiahnuté lenticely, vnútorný povrch je žltkastý alebo červenohnedý s početnými pozdĺžnymi tenkými vystupujúcimi rebrami. Zlomenina vonkajšej kôry je zrnitá, rovnomerná, vnútorná je vysoko vláknitá, „trieska“. Suchá kôra, bez zápachu, ale po navlhčení vodou sa objaví zvláštny zápach. Chuť je vysoko sťahujúca. Keď sa vnútorný povrch kôry navlhčí roztokom kamenca amónneho, objaví sa čierno-modré sfarbenie (taníny). Kvalitu surovín znižuje stará kôra (hrubšia ako 6 mm), stmavnuté kusy a kusy kratšie ako 3 cm, organické nečistoty.

Mikroskopia ukazuje hnedý korok, mechanický pás, kamenné bunky vo veľkých skupinách, lykové vlákna s kryštalickým obalom, jadrové lúče (na priereze).

Možné nečistoty. Kôra jaseňa - Fraxinus excelsior L. - matná, sivá, ľahko rozlíšiteľná podľa morfologických a anatomických znakov. Pod mikroskopom je viditeľný nesúvislý mechanický pás s nevýznamným počtom kamenných buniek. Vlákna bez kryštalického povlaku.

Chemické zloženie. Kôra obsahuje 10-20% tanínov (podľa GF XI je potrebných aspoň 8%) - deriváty kyseliny galovej a elagovej; 13-14 % pentosanov; do 6 % pektínových látok; kvercetín a cukor.

Skladovanie. V suchých, dobre vetraných priestoroch, balené v 100 kg balíkoch. Čas použiteľnosti do 5 rokov.

Farmakologické vlastnosti. Odvar z dubovej kôry má adstringentné vlastnosti denaturujúce bielkoviny, ktoré poskytujú protizápalový účinok pri vonkajšej aj vnútornej aplikácii.

Experimentálne štúdie účinku odvarov z dubovej kôry vstreknutých do žalúdka odhalili zvýšenie motility žalúdka, zníženie sekrécie šťavy, zníženie enzymatickej aktivity a kyslosti obsahu žalúdka a spomalenie absorpcie žalúdočnou sliznicou.

Všetky časti rastliny majú dezinfekčný účinok. Kyselina galová a jej deriváty majú širokú farmakologickú aktivitu, podobná akcia bioflavonoidy: zahusťujú membrány cievnych tkanív, zvyšujú ich pevnosť a znižujú priepustnosť, majú antiradiačné a antihemoragické vlastnosti.

Antimikrobiálny a antiprotozoálny účinok je spojený s derivátmi kyseliny galovej aj s prítomnosťou katechínov.

Vodný odvar z lúpaných dubových žaluďov a 1: 5 a 1: 10 tinktúra na alkohole (s odstráneným alkoholom) u králikov s alloxánovou cukrovkou znižujú hladinu cukru v krvi, zvyšujú množstvo glykogénu v pečeni a srdcovom svale.

Aplikácia. Odvary z dubovej kôry (1:10) sa používajú pri akútnych a chronických zápalových ochoreniach ústnej dutiny vo forme výplachov, aplikácií na ďasná pri stomatitíde, zápale ďasien a pod.

Ako protijed pri otravách soľami ťažkých kovov, alkaloidmi, hubami, bielenými, dopingovými, pri otravách jedlom a iných otravách sa pri opakovaných výplachoch žalúdka používa 20% odvar z dubovej kôry.

Pri popáleninách a omrzlinách sa používa aj 20% odvar z dubovej kôry vo forme obrúskov namočených v studený odvar na postihnuté miesta v prvý deň. Pri kožných ochoreniach sprevádzaných plačom, pri detskej diatéze sa používa odvar z dubovej kôry vo forme všeobecných alebo miestnych kúpeľov, umývaní, aplikácií; pri potiacich nohách sa odporúčajú lokálne kúpele z 10% odvaru z dubovej kôry alebo odvar z dubovej kôry na polovicu s odvarom zo šalvie. o gynekologické ochorenia(kolpitída, vulvovaginitída, prolaps pošvových stien, prolaps pošvy a maternice, erózia krčka maternice a pošvových stien) predpisujte výplach 10% odvarom.

Menej často sa dubová kôra používa na gastroenterokolitídu, úplavicu, malú gastrointestinálne krvácanie(vnútri 10% odvaru), pri proktitíde, paraproktitíde, trhlinách v konečníku, hemoroidoch, prolapse konečníka (liečivé klystíry, umývanie, aplikácie, sedacie kúpele).

Odvar z dubovej kôry (Decoctum corticis Quercus) sa pripravuje v pomere 1:10. Kôra sa rozdrví na veľkosť častíc nie väčšiu ako 3 mm, vloží sa do smaltovanej misky, zaleje sa horúcou prevarenou vodou, prikryje sa viečko, zahrievané vo vriacom vodnom kúpeli za častého miešania počas 30 minút, ochladené 10 minút, prefiltrované, vyžmýkané, objem výsledného vývaru sa doplní prevarenou vodou na 200 ml.

V lekárni sú z liečivých prípravkov s obsahom dubovej kôry "Dubová kôra" a dentálny gél "Vitadent".

"Vitadent" sa používa na liečbu a prevenciu zápalových ochorení ústnej dutiny a parodontu.

"Dubová kôra" sa používa na liečbu stomatitídy, gingivitídy, tonzilitídy, faryngitídy, eliminácie a prevencie zápachu z úst; na popáleniny, omrzliny, infikované rany, preležaniny, mozole.

2) Séria troch dielov - Bidens tripartita

Použitou surovinou je motýľ (Herba Bidentis) (obr. 2)

Ryža. 2. Séria troch dielov

Botanická charakteristika. Jednoročná bylina vysoká 15 až 100 cm.Keňové korene, rozkonárené. Stonka je okrúhla, opačne rozvetvená. Listy sú krátko stopkaté, trojčlenné, s väčším kopijovitým a po okraji pílkovité stredný lalok, protistojný. Košíky, na koncoch konárov často jednoduché, dvojradová obaľovačka. Kvety sú rúrkovité, špinavo žlté. Plodom je klinovitá nažka, sploštená, 6-8 mm dlhá, s dvoma "húževnatými" na vrchole. Kvitne od júna do septembra, plodí v auguste až septembri. Možnou prímesou sú iné, spolu rastúce druhy sekvencie. Liečivé vlastnosti radu žiarivých a visiacich boli študované a potvrdené, no ešte nie sú pripravené, rovnako ako svah.

Rozširovanie, šírenie. Všade, okrem Ďalekého severu.

Habitat. Rastlina je hygrofilná. Rastie na vlhkých miestach, v močiaroch, na brehoch riek a potokov, v zeleninových záhradách ako burina.

Prázdne. Trávu alebo listy dlhé do 15 cm počas vegetácie striháme alebo trháme, kým sa nevytvoria púčiky. Vo viac neskoré termíny zbierajte iba bočné výhonky. Suroviny sa čistia z hrubých kvitnúcich stoniek. Na plantážach sa používa mechanizovaný zber listnatých strunových stoniek.

Čeľaď astrovitých - Asteraceae

Bezpečnostné opatrenia. Rastlina sa pestuje. Pri zbere na lúkach by ste nemali pošliapať vlasec a trávnatý porast.

Sušenie. V sušičkách prirodzeného tepla. Suroviny sú rozložené vo vrstve 5-7 cm.Koniec sušenia je určený krehkosťou stopiek a stoniek. Produkcia suchých surovín je 25%. Na začiatku sušenia by sa mala surovina denne obracať. Pri umelom sušení sú povolené teploty do 35-40 ° C.

Vonkajšie znaky. Podľa GF XI surovinu tvoria vrchné listnaté stonky dlhé až 15 cm, s púčikmi alebo bez nich. Farba je tmavozelená. Vôňa je zvláštna, pri trení sa zintenzívňuje. Chuť je sťahujúca a horká. Nečistoty v podobe stoniek dlhších ako 15 cm, hnedých častí a častí iných rastlín, semien znižujú kvalitu surovín. Pravosť surovín je určená vonkajšie znaky a mikroskopicky. Charakteristické sú mnohobunkové chĺpky dvoch typov: húsenica - pozostáva z 9-12 (až 18) krátkych, s tenkými membránami buniek, na báze chĺpku leží predĺžená veľká bunka pokrytá zloženou kutikulou; väčšie chĺpky s hrubými membránami – základ chlpu je mnohobunkový, často sú bunky usporiadané v 2-3 radoch; koncová bunka je špicatá; povrch chĺpkov s pozdĺžnymi záhybmi kutikuly.

Chemické zloženie. Bylina obsahuje silicu, flavonoidy, deriváty kyseliny škoricovej, triesloviny s vysokým obsahom polyfenolovej frakcie ( najväčší počet vo fáze pučania), polysacharidy (2,46%, GF XI nie menej ako 3,5%), karotenoidy a karotén (hromadí sa v čase kvitnutia až 50-60 mg% vo vrcholoch), kyselina askorbová (počas kvitnutia až 950 mg%)), kumaríny, chalkóny. Rastlina je schopná akumulovať mangán.

Skladovanie. Na suchom mieste zabalené do balíkov, balov alebo vriec. Čas použiteľnosti je 3 roky.

Farmakologické vlastnosti. Tinktúra série, injikovaná do žily zvieraťa, má sedatívne vlastnosti, znižuje krvný tlak (BP) a súčasne mierne zvyšuje amplitúdu srdcových kontrakcií. V experimentoch boli zistené antialergické vlastnosti prípravkov série, ktoré sú vysvetlené vysokým obsahom v rastline kyselina askorbová, ktorý stimuluje funkciu nadobličiek a všestranne pôsobí na metabolické procesy v organizme. Antialergický účinok sa prejavuje oslabením symptómov experimentálneho anafylaktického šoku a oneskorením rozvoja Arthusovho fenoménu u zvierat. Po odstránení hypofýzy u pokusných zvierat nebol pozorovaný antialergický účinok sekvencie.

Komplex flavonoidov a polysacharidov, rad tripartitných, klesajúcich a radiálnych, má skutočne choleretické vlastnosti. Kombinácia flavonoidov a polysacharidov z radu kvapkavých v experimente prevyšuje flamin stimulačným účinkom na cholatosyntetickú funkciu, zvyšuje obsah konjugovaných žlčových kyselín a cholatocholesterolový koeficient žlče. Flavonoidy majú inherentné hepatoprotektívne vlastnosti, ktoré zahŕňajú choleretické, cholatostimulačné, protizápalové a kapilárne posilňujúce zložky. Kombinácia flavonoidov a vo vode rozpustných polysacharidov v sérii pomáha zlepšiť vstrebávanie rastlinný komplex otáčania a zvyšovanie jeho aktivity. V experimente flavonoidy tripartitnej a klesajúcej sekvencie eliminovali účinok hepatotropných jedov, vrátili sekréciu žlče a hladinu cholátov na kontrolné hodnoty. Metabolizmus ovplyvňujú aj mangánové ióny nachádzajúce sa v rastline. Sú súčasťou rôznych enzýmových systémov, ovplyvňujú procesy krvotvorby, funkciu pečeňovej bunky, tonus stien ciev, žlčových ciest, sú schopné predchádzať vzniku intravaskulárnych trombov.

Esenciálne extrakty zo šnúry v experimente majú antimikrobiálny účinok proti grampozitívnym baktériám a niektorým patogénnym hubám. Flavonoidné zlúčeniny radu (flavóny a chalkóny) majú bakteriostatické a insekticídne vlastnosti.

Antimikrobiálne a protizápalové vlastnosti radových liečiv sú tiež spojené s tanínmi, ktorým dominujú štruktúrne jednoduché polyfenoly, ktoré majú výraznejšie antimikrobiálne vlastnosti ako taníny, ako sú taníny.

Výrazné antimikrobiálne vlastnosti struny sú navyše spojené s vysokým obsahom mangánu v jej prípravkoch.

Prípravky série pri lokálnej aplikácii zlepšujú tkanivový trofizmus; pri tepelné popálenie u zvierat alkoholové extrakty vlaku pôsobia protizápalovo a ochranne.

Aplikácia. Séria je jednou z najstarších ľudových drog. Vnútri sa vlak berie ako diuretikum, diaforetikum a antipyretikum vo forme nálevov a „čajov“.

S ochorením obličiek a močové cesty odporúča sa nasledovné poplatok za lieky: postupnosť 2 diely, medvedica 3 diely, púčiky brezy 1 diel. Zo zberu sa pripravuje odvar.

Séria sa používa na psoriázu, mikrobiálny ekzém, epidermofytózu, alopecia areata. Pri psoriáze sa sekvencia podáva perorálne vo forme infúzie (20, 0: 200, 0). Vezmite 1/4 šálky infúzie 2-3 krát denne.

Na žihľavku sa používa liečivá zbierka, do ktorej patrí motýľ, listy žihľavy, bylina (alebo kvety), listy čiernych ríbezlí, korene lopúcha a listy jahody. Na prípravu nálevu vezmite 1 polievkovú lyžicu z každej rastliny a zalejte 1 litrom studenej vody, na miernom ohni povarte 10 minút, prefiltrujte a užívajte 2 polievkové lyžice každú hodinu, kým vyrážka nezmizne.

Pri kožných chorobách sa vo forme odvaru používa zmes strukovín, listov žihľavy, kvetov rebríka, listov čiernej ríbezle po 10g, bylinky fialky trojfarebnej (20g), koreňa lopúcha (15g) a listov jahody (15g). (1 polievková lyžica zberu na 200 ml vody).

Pri kožných ochoreniach (diatéza) a krivici sa postupnosť používa aj vo forme nálevu (10-30 g bylinky) do kúpeľa. Nálev sa vleje do kúpeľa a 100 g varenia resp morská soľ... Teplota vody v kúpeli je 37-38 ° С. S plačlivým ekzémom a diatézou sú predpísané všeobecné a miestne kúpele s trávou, dubová kôra a kvety harmančeka. Z každej rastliny vezmite 1 polievkovú lyžicu, 10-12 hodín nechajte v 1 litri studenej vody, potom priveďte do varu, prefiltrujte a nalejte nálev do kúpeľa (pre detský kúpeľ 10 litrov vody, teplota 37-38 ° C). Pri kúpaní pacienta s exsudatívnou diatézou a kožnými vyrážkami sa koncentrácia sekvencie môže zvýšiť 2-3 krát. Pri všetkých typoch lokálnych svrbivých dermatóz sa používajú lokálne kúpele (napr. na končatiny, sedacie kúpele na svrbenie hrádze u pacientov cukrovka s hemoroidmi). Pri svrbení v oblasti chrbta, šije, podpazušia a slabín možno odporučiť aplikáciu zaparenej bylinky z povrazu alebo obkladov so silnými nálevmi. Pri neurodermatitíde, sprevádzanej ťažkým svrbením, sa infúzia série používa vo forme aplikácií s lokálnymi anestetickými látkami (novokaín, anestezín). Pri plačúcej diatéze u detí sa látka navlhčí odvarom vlaku a aplikuje sa na pokožku, pričom sa pleťové vody vymieňajú 5-6 krát denne. V prípade zápalu sa pleťové vody používajú za studena.

Navonok sa sekvencia používa aj pri liečbe hnisavých rán, trofických vredov s príznakmi zápalu. Sekvencia vysušuje povrch rany a podporuje rýchlejšie hojenie postihnutých oblastí kože. Sekvencia sa používa na prípravu podnosov, pleťových vôd a mazív na mikrobiálny ekzém nôh, epidermofytózu ( najlepšie skóre získané pri liečbe intertriginóznej formy epidermofytózy).

Séria sa používa ako kozmetika na akné, seboreu. Umývajú si tvár odvarom, vyrábajú kozmetické masky.

Nálev zo série bylín (Infusum herbae Bidentis): 10 g byliny sa vloží do smaltovanej misky, zaleje sa 200 ml vody izbovej teploty, prikryje sa pokrievkou, zahrieva sa vo vriacom vodnom kúpeli za častého miešania 15 minút Zmes sa ochladí na teplotu miestnosti počas 45 minút, prefiltruje sa a pridá sa voda na objem 200 ml. Vezmite 1 polievkovú lyžicu 2-3 krát denne.

Ako liečivý prípravok je „Charedy Grass“ vyrábaný v dvoch typoch: drvený a vo filtračných vreckách. Medzi liečivé prípravky obsahujúce bylinu z radu patrí Elekasol, Brusniver.

Brusniver - droga rastlinného pôvodu, má diuretický, antimikrobiálny a protizápalový účinok, používa sa pri ochoreniach urogenitálnych orgánov a konečníka.

Elekasol - kombinovaný liek rastlinného pôvodu, má antimikrobiálny a protizápalový účinok. Aktívne proti stafylokokom, Escherichia coli, Pseudomonas aeruginosa, Proteus. Stimuluje reparačné procesy. Používa sa pri komplexnej terapii ochorení dýchacích ciest a orgánov ORL ( chronická tonzilitída, akútna laryngofaryngitída, akútna a chronická faryngitída tracheitída, bronchitída); v zubnom lekárstve (akútna a recidivujúca aftózna stomatitída, lichen planus ústnej sliznice, paradentóza); v gastroenterológii ( chronická gastroduodenitída enteritída, kolitída, enterokolitída); v dermatológii (mikrobiálny ekzém, neurodermatitída, rosacea, acne vulgaris); v gynekológii (nešpecifické zápalové ochorenia vagíny a krčka maternice vrátane kolpitídy, cervicitídy, stavy po diatermii a kryodeštrukcii erózie krčka maternice); v urológii (chronická pyelonefritída, chronická cystitída, uretritída, chronická prostatitída).

2. 2. Technika mikroskopického skúmania liečivých rastlinných surovín

Na potvrdenie pravosti surovín sa vykonalo mikroskopické vyšetrenie liečivých rastlinných surovín.

Mikroskopické vyšetrenie vzoriek bolo uskutočnené pomocou biologického mikroskopu Motic BA 600 ("Motic", krajina pôvodu Španielsko)

Mikroskop je vybavený binokulárnou hlavicou, širokouhlými okulármi WF 10x / 18, 4-drážkovou otočnou hlavicou, mechanickým stolíkom s možnosťou pohybu preparátu v rozsahu 75x35 mm v smere X resp. s presnosťou 0,1 mm, čo umožňuje zvoliť optimálnu polohu pozorovaného objektu má oddelené hrubé a jemné zaostrovanie. Štandardná 12-bitová digitálna farebná kamera Motic Pro 285A. Mikropreparát je prezentovaný vo forme virtuálneho preparátu (grafického súboru).

Automatické digitálne skenovanie biologických preparátov sa uskutočnilo pomocou softvéru Motic Educator.

Rastlinný materiál vybraný na mikroskopické vyšetrenie sa vloží do skúmavky a spracuje sa na osvietenie: rastlinný materiál sa zaleje 2-3% roztokom hydroxidu sodného (alebo čistenou vodou) a varí sa 1-2 minúty. Potom sa kvapalina opatrne scedí a materiál sa dôkladne premyje vodou a vloží do Petriho misky.

Kúsky suroviny sa odoberú z vody pomocou skalpela (alebo špachtle) a pitevnej ihly a umiestnia sa na podložné sklíčko do kvapky glycerínu alebo vodného roztoku.

Na podložnom sklíčku sa jeho 4 mm kúsok rozdelí na dve časti skalpelom alebo pitevnou ihlou; jedna z nich je jemne prevrátená, aby bolo možné pozorovať surovinu pod mikroskopom z hornej a spodnej strany.

Poháre používané na prípravu mikroprípravkov musia byť čisté a suché. Prípravok na podložnom sklíčku prikryte krycím sklíčkom. Pri neopatrnom priložení krycieho skla sa v prípravku často tvoria vzduchové bubliny, preto treba sklo položiť šikmo, najskôr sa jedným okrajom dotknúť tekutiny, a potom, držiac sklo ihlou, úplne položiť. Zachytené vzduchové bubliny je možné odstrániť ľahkým poklepaním na krycie sklíčko tupým koncom pitevnej ihly alebo miernym zahriatím nad plameňom horáka. Po ochladení skúmajte pod mikroskopom, najskôr pri malom, potom pri veľkom zväčšení.

Ak tekutina s obsahom nevyplní celý priestor medzi podložným sklíčkom a krycím sklom, alebo sa pri zahriatí prípravku vyparí, pridáva sa zboku po malých kvapkách. Ak naopak krycie sklo pre prebytočné množstvo tekutiny voľne pláva, treba ho odsať pásom filtračného papiera privedeným zboku.

Pri príprave mikroprípravku z hrubých listov sa hrubé žilky predbežne rozdrvia skalpelom a snažia sa odstrániť epidermis z platne, prípadne natiahnutím listu oddeliť mezofyl od epidermy, aby bol prípravok tenší.

2. 3. Metóda spektrofotometrického výskumu

Na porovnávacie posúdenie obsahu tanínov v LSR bola použitá metóda spektrofotometrie. Stanovenie sa uskutočnilo na spektrofotometri UNICO - 2800.

Pri stanovení bola maximálna absorpcia vodno-alkoholovej extrakcie zo surovín pozorovaná pri vlnovej dĺžke 276 ± 2 nm. Tento indikátor zodpovedá maximálnej absorpcii tanínu, čo umožnilo použiť vlnovú dĺžku 276 ± 2 nm ako analytický indikátor prítomnosti tanínov v surovine. V procese spektrofotometrického stanovenia tanínov v kôre duba obyčajného sa zistil celkový obsah tanínov v liečivých rastlinných surovinách.

Asi 0,8 g (presne odváženej) suroviny rozdrvenej na veľkosť častíc 2 mm sa nalialo do 100 ml vody a zahrievalo sa vo vriacom kúpeli počas 30 minút, potom nasledovalo 30 minút usadzovania pri teplote miestnosti. získaný extrakt sa prefiltroval cez skladaný filtračný papier do 100 ml banky a doplnil po značku vodou.

5 ml získaného extraktu sa vložilo do odmernej banky s objemom 50 ml, doplnené po značku vodou so 70% etylalkoholom. Optická hustota výsledného roztoku sa merala na spektrofotometrickej kyvete s hrúbkou vrstvy 10 mm pri vlnovej dĺžke 274,5 až 277,5 nm vzhľadom na etylalkohol. Paralelne sa merala optická hustota vzorky tanínu.

kde M CT je hmotnosť tanínu; M x je hmotnosť surovín; D CT je optická hustota CO roztoku tanínu; Dx je optická hustota testovaného roztoku.

Spektrofotometrické stanovenie obsahu trieslovín v dubovej kôre sa uskutočnilo na dvoch druhoch surovín: čerstvo zberaných (dátum zberu - 13.5., zber sa uskutočnil vo vzdialenosti 70 km od mesta Orenburg) a hotový liek 9 vyrobený OJSC Krasnogorskleksredstva. dátum výroby -01. 04.2009)

KAPITOLA 3. POROVNÁVACIA ANALÝZA OBSAHU OPAĽOVACÍCH LÁTOK V ČERSTVÝCH ZBERANÝCH A HOTOVÝCH LIEČIVÝCH RASTLINNÝCH SUROVINÁCH

Uskutočnil sa mikroskopický rozbor liečivých rastlinných surovín duba obyčajného a trojzubca.

Na priereze dubovej kôry je viditeľná hnedá korková vrstva početných radov buniek. Vo vonkajšom kortexe sú drúzy šťavelanu vápenatého, skupina kamenných buniek a majú diagnostická hodnota takzvaný mechanický pás, tangenciálne umiestnený v určitej vzdialenosti od korku a pozostávajúci zo striedajúcich sa skupín lykových vlákien a kamenných buniek. Vo vonkajšom kortexe sú skupiny vlákien a kamenných buniek rozptýlené smerom dovnútra z pletenca. Niektoré bunky parenchýmu obsahujú flobafény vo forme červenohnedých inklúzií. Vo vnútornej kôre sú badateľné početné tangenciálne predĺžené skupiny lykových vlákien s kryštalickou pošvou, umiestnené v paralelných koncentrických pásoch. Medzi skupinami vlákien prechádzajú jednoradové medulárne lúče, zriedkavejšie sa vyskytujú širšie lúče, ktoré obsahujú skupiny kamenných buniek v blízkosti kambia, čo spôsobuje po vysušení tvorbu pozdĺžnych rebier viditeľných na vnútornom povrchu kôry ( Obr. 3). Prášok sa vyznačuje prítomnosťou mnohých útržkov skupín vlákien s kryštalickým plášťom a skupín kamenných buniek, viditeľné sú kúsky hnedého korku; zriedkavo sa vyskytujú drúzy šťavelanu vápenatého; obsah parenchýmových buniek sa farbí roztokom železno-amónneho kamenca v čierno-modrej farbe.

Ryža. 3. Mikroskopia dubovej kôry (fragment v reze):

1 - korok; 2 - kollenchým; 3 - drúza šťavelanu vápenatého; 4 - mechanický pás;

5 - kamenné bunky; 6 - lykové vlákna s povlakom nesúcim kryštály; 7 - jadrový nosník.

Pri skúmaní listu série tripartity z povrchu je viditeľná epidermis hornej a dolnej strany s vinutými stenami. Stomata sú početné, obklopené 3-5 bunkami epidermis (anomocytický typ). Po celej listovej čepeli sú jednoduché „húsenicovité“ chĺpky s tenkými stenami, pozostávajúce z 9-12 buniek, niekedy vyplnené hnedým obsahom; pozdĺžne skladanie kutikuly je dobre vyjadrené na spodnej bunke vlasu. Pozdĺž okraja listu a žiliek sú jednoduché chĺpky s hrubými stenami a pozdĺžnymi záhybmi kutikuly, pozostávajúce z 213 buniek. Na báze týchto chĺpkov je niekoľko buniek epidermis, mierne stúpajúcich nad povrch listu. Pozdĺž žiliek prebiehajú sekrečné chodby s červenohnedým obsahom, obzvlášť dobre viditeľné po okraji listu (obr. 4).

Ryža. 4. Mikroskopia listu sekvencie trojdielneho: A - epidermis hornej strany listu; B - epidermis spodnej strany listu; B - okraj listu: 1 - chĺpky; 2 - hrubostenné

chĺpky; 3 - sekrečné priechody.

Výsledky spektrofotometrického stanovenia kvantitatívneho obsahu tanínov v surovom dube sú na obr. 5 a tab. 2.

Ryža. 5. Absorpčné spektrá roztokov v 70% etylalkohole:

1 - extrakcia vody z čerstvo zozbieraných liečivých rastlinných surovín; 2 - extrakcia vody z hotového lieku.

Tabuľka 2

Spektrofotometrické stanovenie obsahu trieslovín v tráve trojdielneho seriálu bolo realizované na dvoch druhoch surovín: čerstvo zberaných (dátum zberu - 21.05.13, zber bol realizovaný vo vzdialenosti 70 km od mesto Orenburg) a hotovú liečivú rastlinu (výrobca Fito-Bot LLC, dátum výroby - 01.02.2011)

Výsledky spektrofotometrického stanovenia kvantitatívneho obsahu tanínov v surovine tripartitného vlaku sú na obr. 6 a tab. 3.

Ryža. 6. Absorpčné spektrá roztokov v 70% etylalkohole: 1 - vodný extrakt z čerstvo zozbieraných liečivých rastlinných surovín; 2 - extrakcia vody z hotového lieku.

Je teda vidieť, že obsah tanínov v čerstvo zozbieraných a hotových liečivých rastlinných surovinách rovnakého rastlinného druhu je rozdielny. A hoci oba ukazovatele spĺňajú požiadavky regulačných dokumentov (ND), obsah tanínov v čerstvo zozbieraných liečivých rastlinných surovinách je vyšší. Rozdiely v hodnotách možno vysvetliť vplyvom podmienok zberu, sušenia a skladovania liečivých rastlinných surovín, pretože pod vplyvom rôznych faktorov (svetlo, teplota, vlhkosť atď.) dochádza k oxidácii a hydrolýze tanínov. , čo sa odráža v kvantitatívnom obsahu tanínov v surovine.

Tabuľka 3

ZÁVERY

1. Taníny sú bezdusíkaté, netoxické, zvyčajne amorfné zlúčeniny, mnohé z nich sú ľahko rozpustné vo vode a alkohole, majú silnú adstringentnú chuť. Na území regiónu Orenburg sa najčastejšie vyskytujú čeľade rastlín s obsahom trieslovín: buk - Fagaceae, (dub letný - Quercus robur), Astrovye-Asteraceae (trojdielna postupnosť - Bidens tripartita), čeľade ružové - Rosaceae obyčajné - Padus avium), vŕba - Salicaceae (vŕba biela - Salix alba), muškáty - Geraniaceae (pelargónie lesné - Geranium sylvaticum) atď.

Z uvedených rastlín je potrebné venovať najväčšiu pozornosť takým liečivým rastlinám, ako je dub obyčajný (Quercus robur) a vláčik trojčlenný (Bidens tripartita), keďže sa najčastejšie vyskytujú v oboch čerstvé a ako hotový liek.

2. Ukazovatele obsahu tanínov v surovinách získaných v priebehu štúdia spĺňajú požiadavky ND.

3. Na základe vykonaného výskumu možno usúdiť, že obsah trieslovín v čerstvo zozbieranej rastlinnej surovine je vyšší ako v hotovej liečivej rastlinnej surovine.

4. Rozdiely v hodnotách možno vysvetliť vplyvom podmienok zberu, sušenia a skladovania liečivých rastlinných surovín, pretože pod vplyvom rôznych faktorov (svetlo, teplota, vlhkosť atď.) dochádza k oxidácii a hydrolýze dochádza k trieslovinám, čo sa prejavuje v kvantitatívnom obsahu tanínov v surovine.

5. Zlepšiť kvalitu liečby a prevencie rôzne choroby, pri ktorých sa používajú drogy s obsahom trieslovín, bude efektívnejšie používať odvary a nálevy z čerstvo zozbieraných surovín.

BIBLIOGRAFIA

1. Brezgin NN Liečivé rastliny oblasti Horného Volhy. - Jaroslavľ, 1984, 224 s.

2. GOST 24027. 2-80 Liečivé rastlinné suroviny. metódy na stanovenie obsahu vlhkosti, obsahu popola, extraktív a tanínov, silice 06.03.1980

3. Danilová N. A., Popová DM. Kvantitatívne stanovenie tanínov v koreňoch šťavela konského spektrofotometriou v porovnaní s metódou manganatometrie. Bulletin VSU. Séria: Chémia. Biológia. Lekáreň. 2004. Číslo 2. s. 179-182. RU 2127878 C1, 20.03.1999.

4. Divoký úžitkové rastliny Rusko / Otv. vyd. A. L. Budantsev, E. E. Lesiovskaya. - SPb .: Vydavateľstvo SPKhFA, 2001 .-- 664 s.

5. Kurkin VA Farmakognózia: Učebnica pre študentov farmaceutických univerzít. - Samara: OOO "Letanie", GOUVPO "SamSMU", 2004. - 1200 s.

6. Kovalev VN Workshop o farmakognózii. Učebnica. manuál pre stud. univerzity: -M., Vydavateľstvo NUPh; Zlaté stránky, 2003 .-- 512 s.

7. Liečivé rastlinné suroviny. Farmakognózia: Učebnica / Ed. G. P. Yakovleva a K. F. Blinová. - SPb .: SpetsLit, 2004 .-- 765 s.

8. Liečivé suroviny rastlinného a živočíšneho pôvodu. Farmakognózia: učebnica. manuál / Pod. vyd. G. P. Jakovleva. - SPb .: SpetsLit, 2006 .-- 845 s.

9. Materiály stránky http: // med-tutorial. ru

10. Materiály stránky http: // medencped. ru

11. Muravyová DA Farmakognózia: Učebnica / DA Muravyová, IA Samylina, GP Yakovlev. - M .: Medicína, 2002 .-- 656s.

12. Nosal MA, Nosal IM Liečivé rastliny v ľudovom liečiteľstve. Moskva JV "Vneshiberika" 1991. -573 s.

13. Workshop o farmakognózii: Učebnica. príručka pre vysoké školy / V. N. Kovalev, N. V. Popova, V. S. Kislichenko a ďalší; Pod celkom. vyd. V. N. Kovaleva. - Charkov: Vydavateľstvo NfaU: Zlaté stránky: MTK - Kniga, 2004. - 512 s.

14. Usmernenie k metódam kontroly kvality a bezpečnosti biologicky aktívnych potravinárskych prídavných látok. Zvládanie. R 4.1.1672-03. - M., 2003, s. 120.

15. Sokolov S. Ya., Zamotaev IP Príručka liečivých rastlín. -M .: Vzdelávanie, 1984.

16. Príručná príručka NI Grinkevich. Liečivé rastliny. -M .: Vysoká škola, 1991.

Stiahnite si diplom: Nemáte prístup k sťahovaniu súborov z nášho servera.

Na získanie množstva tanínov sa rastlinné suroviny extrahujú horúcou vodou v pomere 1:30 alebo 1:10.

Kvalitatívne reakcie na triesloviny možno ďalej rozdeliť

pre 2 skupiny:

Ø Všeobecné zrážacie reakcie – na dôkaz trieslovín

Ø Skupina - na zistenie príslušnosti tanínov k určitej skupine

Na detekciu tanínov v rastlinných materiáloch sa používajú tieto reakcie:

1. Špecifická reakcia na taníny je zrážacia reakcia so želatínou. Použite 1% roztok želatíny v 10% roztoku chloridu sodného. Objaví sa vločkovitá zrazenina, rozpustná v nadbytku želatíny. Negatívna reakcia so želatínou naznačuje neprítomnosť trieslovín.

2. Reakcia so soľami alkaloidov. Amorfná zrazenina vzniká v dôsledku tvorby vodíkových väzieb s hydroxylovými skupinami tanínov a atómami dusíka alkaloidu.

Tieto reakcie poskytujú rovnaký výsledok bez ohľadu na skupinu tanínov.

Reakcie na určenie skupiny tanínov.

1.Styasny reakcia - s 40% roztokom formaldehydu a konc. HCl -

Kondenzované taníny tvoria tehlovočervenú zrazeninu

2. Brómová voda (5 g brómu v 1 l vody) - brómovú vodu pridávajte po kvapkách do 2-3 ml skúšobného roztoku, kým sa v roztoku neobjaví zápach brómu; v prítomnosti kondenzovaných tanínov vzniká oranžová alebo žltá zrazenina.

3. Farbenie železitými soľami, železno-amónnym kamencom -

čierna a modrá (taníny hydrolyzovateľnej skupiny, ktoré sú derivátmi pyrogallolu)

alebo čiernozelené (kondenzované skupinové taníny, ktoré sú derivátmi pyrokatecholu).

4 katechíny dodávajú červené sfarbenie vanilínom

(v prítomnosti koncentrovanej HCl alebo 70 % H 2 SO 4 vzniká jasne červená farba).

Pri tejto reakcii tvoria katechíny farebný produkt nasledujúcej štruktúry:

Reakciou, ktorá odlišuje pyrogalické tannidy od pyrokatecholických, je reakcia s nitrózometyluretánom.

Pri varení roztokov tanínov s nitrózometyluretánom sa pyrokatecholové tannidy úplne vyzrážajú,

a prítomnosť pyrogalických tanidov sa dá vo filtráte zistiť pridaním železno-amonného kamenca a octanu sodného - filtrát sa sfarbí do fialova.

Voľná kyselina elagová dáva červenofialovú farbu, keď sa pridá s niekoľkými kryštálmi dusitanu sodného a tromi až štyrmi kvapkami kyseliny octovej.

7. Na detekciu viazanej kyseliny ellagovej (alebo kyseliny gaxaoxidifénovej) sa kyselina octová nahradí 0,1 N. kyselina sírová alebo chlorovodíková (karmínovo-červená farba, prechádzajúca do modrej).

8. Taníny s bielkovinami vytvárajú vode nepriepustný film (opaľovanie). Tým, že spôsobujú čiastočnú koaguláciu bielkovín, vytvárajú ochranný film na slizniciach a povrchu rany.

9. Pri kontakte so vzduchom (napríklad rezanie čerstvých podzemkov) triesloviny ľahko oxidujú, menia sa na flobafény alebo sfarbenie, ktoré spôsobujú tmavohnedú farbu mnohých kôr a iných orgánov, nálevov.

Flobafény sú nerozpustné v studenej vode, rozpúšťajú sa v horúcej vode, farbiace odvary a nálev hnedé.

10. S 10% roztokom stredného octanu olovnatého (súčasne pridajte 10% roztok kyseliny octovej):

vznikne biela zrazenina nerozpustná v kyseline octovej - taníny hydrolyzovateľnej skupiny (zrazenina sa odfiltruje a vo filtráte sa stanoví obsah kondenzovaných tanínov, s 1% roztokom železo-amónneho kamenca - čiernozelené sfarbenie);

biela zrazenina, rozpustná v kyseline octovej - kondenzované skupinové taníny.