Kvantitatívne stanovenie tanínov podľa GF 13. Ahoj študent

Izolácia od VRS . Taníny sú zmesou rôznych polyfenolov so zložitou štruktúrou a sú veľmi labilné, preto je izolácia a analýza jednotlivých zložiek tanínov veľmi náročná. Na získanie množstva tanínov sa rastlinné suroviny extrahujú horúcou vodou, ochladia sa a potom sa extrakt postupne spracuje:

Petroléter (čistenie chlorofylu, terpenoidov, lipidov);

Dietyléter extrahujúci katechíny, kyseliny hydroxyškoricové a iné fenoly

Etylacetát, do ktorého prechádzajú leukoantokyanidíny, estery kyseliny hydroxyškoricovej a pod.. Zvyšný vodný extrakt s tanínmi a inými fenolickými zlúčeninami a frakcie 2 a 3 (dietyléter a etylacetát) sa rozdelí na jednotlivé zložky mletím rôzne druhy chromatografia. Použitie:

a) adsorpčná chromatografia na celulózových kolónach,

b) deliaca chromatografia na silikagélových kolónach;

c) iónomeničová chromatografia;

d) gélová filtrácia na kolónach Sephadex a pod.

Identifikácia jednotlivých tanínov je založená na porovnaní RF v chromatografických metódach (na papieri, v tenkej vrstve sorbentu), spektrálnych štúdiách, kvalitatívnych reakciách a štúdiu produktov štiepenia (pre hydrolyzovateľné taníny).

Kvantifikácia tanínov . možno rozdeliť na gravimetrické, titrimetrické a fyzikálno-chemické.

Gravimetrické metódy na základe kvantitatívneho vyzrážania tanínov soľami ťažké kovyželatína alebo adsorpcia gélovým práškom. Vážená jednotná metóda (BEM) široko používané v kožiarskom priemysle. Metóda je založená na schopnosti tanínov vytvárať pevné väzby s kožným kolagénom. Na tento účel sa výsledný vodný extrakt z MPC rozdelí na dve rovnaké časti. Jedna časť sa odparí, vysuší a odváži. Druhá časť je ošetrená kožným (nahým) práškom, filtrovaná. Filtrát sa odparí, vysuší a odváži. Rozdiel medzi suchými zvyškami časti 1 a 2 (t. j. kontrola a skúsenosť) určuje obsah tanínov v roztoku.

Titračná metóda, zaradená do GF-XI, označovaná ako Leventhal-Neubauerova metóda, je založená na oxidácii fenolových OH skupín manganistanom draselným (KMnO 4) v prítomnosti kyseliny indigosulfónovej, ktorá je regulátorom a indikátorom reakcie. Po úplnej oxidácii tanínov sa kyselina indigosulfónová začne oxidovať na isatín, v dôsledku čoho sa farba roztoku zmení z modrej na zlatožltú. Ďalšia titračná metóda na stanovenie tanínov, metóda zrážania tanínu síranom zinočnatým s následnou komplexometrickou titráciou Trilonom B za prítomnosti xylénovej pomaranče, sa používa na stanovenie tanínu v listoch sumachu trieslového a garbiarskej.

Fyzikálne a chemické metódy na stanovenie tanínov:

1) kolorimetrické- DV poskytujú farebné zlúčeniny s fos-molibom alebo fosfo-volfrámom to-mi v prítomnosti Na 2 CO 3 alebo s Folin-Denisovým činidlom (pre fenoly).

2) chromato-spektrofotometrická A nefelometrické metódy, ktoré sa využívajú najmä vo vedeckom výskume.

Rozšírenie v rastlinnom svete, podmienky vzniku a úloha rastlín. Nízky obsah trieslovín bol zaznamenaný v obilninách. V dvojklíčnolistových patrí do niektorých čeľadí - napríklad ružienka, pohánka, strukoviny, vŕba, sumach, buk, vres mnoho rodov a druhov, kde obsah trieslovín dosahuje 20-30% a viac. Najvyšší obsah trieslovín bol zistený v patologických útvaroch – hálkach (až 60 – 80 %). Drevité formy sú bohatšie na triesloviny ako bylinné. Taníny sú nerovnomerne rozložené v orgánoch a tkanivách rastlín. Hromadia sa najmä v kôre a dreve stromov a kríkov, ako aj v podzemných častiach bylinných trvaliek; zelené časti rastlín sú oveľa chudobnejšie na triesloviny.

Taníny sa hromadia vo vakuolách a počas starnutia buniek sa adsorbujú na bunkové steny. Najčastejšie sa v rastlinách vyskytuje zmes hydrolyzovateľných a kondenzovaných tanínov s prevahou zlúčenín jednej alebo druhej skupiny.

S vekom rastlín množstvo tanínov v nich klesá. Rastliny rastúce na slnku akumulujú viac tanínov ako tie, ktoré rastú v tieni. V tropických rastlinách sa tvorí oveľa viac tanínov ako v rastlinách miernych zemepisných šírok.

Biomedicínske pôsobenie a využitie tanínov . Taníny a LR s ich obsahom sa používajú najmä ako adstringentné, protizápalové a hemostatické látky.

A. Prevažne hydrolyzovateľné:

Rhizomata Bistortae – hadovité rizómy.

Highlander had (hadí koreň, cievka) (Polygonumbistorta) - sem. pohánka, Polygonaceae

Chemické zloženie: 15-25% triesloviny, prevažne hydrolyzovateľné, galová, elagová, askorbová, fenolkarboxylové a organické kyseliny, flavonoidy (kvercetín)

Hlavná činnosť LRS: adstringentný, antiseptický.

Povaha aplikácie. Nálev a odvar sa používa ako sťahujúci, hemostatický, protizápalový pri malom krvácaní v zažívacom trakte, akútnych a chronických zápaloch žalúdka, otrava jedlom, dermatózy, popáleniny, zápaly ústnej dutiny, pošvy, hemoroidy.

FoliaCotinus coggygriae – Listy z kože skumpia.

Garbiareň Skumpia (Cotinuscoggygria) - sem. sumach, Anacardiaceae- rozkonárený ker

Chemické zloženie. 0,2% esenciálny olej(prevláda myrcén), ~25% tanínu, flavonoidy.

Hlavná činnosť LRS: adstringentný, dezinfekčný prostriedok.

Povaha aplikácie. sa používajú na priemyselnú výrobu tanínu a jeho prípravkov, ako aj prípravku Flacumin, čo je súhrn flavonolových aglykónov z listov skumpie a má choleretický účinok.

FoliaRhuscoriariae – trieslovinové listy sumachu.

Tanín sumachu (Rhuscoriariae) - sem. sumach, Anacardiaceae– krík

Chemické zloženie. triesloviny (25 %, prevažuje tanín), flavonoidy (2,5 % - deriváty kvercetínu, myricetínu, kempferolu), kyseliny galová a ellagová.

Hlavná činnosť LRS: adstringentný, dezinfekčný prostriedok.

Povaha aplikácie. sa používajú na priemyselnú výrobu tanínu a jeho prípravkov používaných pri liečbe zápalové procesyústa-nosová dutina výplachom 2% vodným alebo vodno-glycerínovým roztokom, vredy, rany a popáleniny mazaním 3-10% roztokmi a masťami.

Rhizomata Bergeniaecrassifoliae - oddenky badanu hrubolisté.

Badan hrubolistý (Bergenia crassifolia) - sem. lomikameň, Saxifragaceae- trvalka bylinná rastlina

Chemické zloženie: taníny (~27%, z toho tanín - 8-10%), kyselina galová, arbutín (do 22%), voľný hydrochinón (2-4%), kumaríny, živice, vitamín C, cukor,

Povaha aplikácie. Nálev a odvar z koreňov a odnoží bergénie sa používa v gynekológii, stomatológii na zastavenie krvácania a ako protizápalové, antiseptikum, na liečbu zápalu žalúdka a vredov žalúdka a dvanástnika, v tradičná medicína- na liečbu pľúcnej tuberkulózy.

Rhizomataetradices Sanguisorbae -podzemky a korene pálenky.

Burnet officinalis (Sangusorba officinalis) - sem. Rosaceae, Rosaceae- trváca bylinná rastlina

Chemické zloženie LR: taníny, prevažne hydrolyzovateľné (12-20%), elagové, galové kyseliny, flavonoidy, antokyány, katechíny, saponíny.

Hlavná činnosť LRS: adstringentný, hemostatický.

Povaha aplikácie. Oddenky a korene horčiny sa používajú ako odvar a tekutý extrakt ako adstringens pre gastrointestinálne ochorenia, enterokolitídu, hnačku; ako hemostatický prostriedok na krvácanie z maternice a hemoroidov, hemoptýzu.

Fructus Alni – sadenice (šišky) Jelša.

FoliaAlniincanae – listy jelše sivej.

Folia Alniglutinosa– listy čiernej jelše.

Jelša čierna(lepkavý) (Alnusglutinosa), o. sivá (Alnusincana) - sem. breza, Betulaceae stromy alebo veľké kríky.

Chemické zloženie: semená jelše obsahujú triesloviny, kyselinu galovú (až 4%), flavonoidy. V listoch šedá a asi. čierna obsahuje flavonoidy.

Hlavná činnosť LRS: adstringentný, dezinfekčný, protizápalový.

Povaha aplikácie. Odvar a nálev sa užívajú orálne na akútnu a chronickú enteritídu, kolitídu, disinteriu; zvonka - na kloktanie, ústnu dutinu.

B. Prevažne kondenzované:

CorticesQuerques–Dubová kôra.

Dub obyčajný(Querqustrobur) - sem. buk, Fagaceae- mocný strom

Chemické zloženie: taníny (10-20%, hydrolyzovateľné a kondenzované), gallová, elagové kyseliny, flavonoidy

Hlavná činnosť LRS: adstringentný, antibakteriálny.

Povaha aplikácie. vo forme odvaru a nálevu ako vonkajšie adstringentné a protizápalové činidlo na liečbu stomatitídy, zápalu ďasien, zápalu ústna dutina, ženské pohlavné orgány, popáleniny kože, potenie.

Rhizomata Tormentillae – oddenky Potentilla erectus.

Potentilla erectus– Potentilla erecta- sedem. Rosaceae, Rosaceae- trváca bylinná rastlina

Chemické zloženie. taníny (15-30%: prevládajú kondenzované taníny), antokyány, katechíny.

Hlavná činnosť LRS

Povaha aplikácie. Odvar a nálev sa užívajú vnútorne ako adstringentný a protizápalový prostriedok pri zápalových stavoch ústnej dutiny a hrtana, pri poruchách tráviaceho traktu a zvonka pri ekzémoch.

Fructus Vaccinium myrtilličučoriedky.

Cormi Vaccinii mytilli strelcov.

čučoriedka (Vaccinium myrtillus L.) - Heather, Ericaceae- malý krík

Chemické zloženie. taníny (18-20%), vrátane kondenzovaných (5-12%), flavonoidy (hyperín, rutín), antokyány.

Hlavná činnosť LRS: adstringentný, protizápalový.

Povaha aplikácie. častejšie vo forme nálevu, odvaru, želé v súvislosti s fermentačnými a hnilobnými procesmi v črevách, kolitída. Bolo preukázané, že čučoriedky zlepšujú prekrvenie očí, stabilizujú štruktúru sietnice a zlepšujú nočné videnie.

FructusPadi-ovocie vtáčia čerešňa.

Čerešňa obyčajná (padusavium), h) Ázijské (P. asiatica) - sem. Rosaceae, Rosaceae- strom vysoký do 10 m

Chemické zloženie: taníny (15%: prevažne kondenzované), fenolkarboxylové a organické kyseliny, vitamín C, cukry, terpenoidné glykozidy

Hlavná činnosť LRS: adstringentný, dezinfekčný prostriedok.

Povaha aplikácie. Odvar a nálev sa používajú ako adstringens a dezinfekcia tráviaceho traktu: pri úplavici, hnačke. Plody čerešne vtáčej sú zložkou žalúdočných prípravkov.

Majitelia patentu RU 2439568:

Vynález sa týka oblasti farmakológie a môže sa použiť na stanovenie tanínov v rastlinných materiáloch. Metóda stanovenia tanínov v rastlinných surovinách spočíva v extrakcii vzorky surovín vodou pri varení, chladení, filtrovaní, meraní optickej hustoty alikvotnej vzorky pri vlnovej dĺžke 277 nm a výpočte obsahu súčtu všetkých tanínov. podľa určitého vzorca, potom pridanie do alikvotnej vzorky filtrátu 1 % roztok kolagénu v 1 % kyseline octovej sa pretrepe, prefiltruje, zmeria sa optická hustota filtrátu pri vlnovej dĺžke 277 nm a obsah zrazeniny taníny sa vypočíta pomocou určitého vzorca. Metóda umožňuje zvýšiť presnosť stanovenia obsahu tanínov v rastlinných surovinách a selektívne stanoviť zrážané a nezrážané triesloviny v rastlinných surovinách.

Vynález sa týka farmaceutického priemyslu, oblasti farmakognózie a farmaceutickej chémie a môže byť použitý na kontrolu kvality rastlinných materiálov obsahujúcich taníny.

Známa metóda na stanovenie tanínov v liečivých rastlinných materiáloch (MPR) coulometriou z hľadiska tanínu (SG Abdullina a i.. Coulometrické stanovenie tanínov v liečivých rastlinných materiáloch. // Lekáreň. č. 4. - 2010. - P. 13 - 15).

Nevýhodou tejto metódy je použitie prídavného zariadenia (coulometer), špecifického titrantu (hypojodid draselný), ktorý sa z hľadiska oxidačných vlastností približuje manganistanu draselnému a neumožňuje odlíšiť vysokomolekulárne a nízkomolekulárne taníny.

Známa je aj metóda na stanovenie obsahu tanínu a derivátov kyseliny galovej v čaji pomocou konduktometrie (Patent č. 2127878. Metóda na samostatné stanovenie tanínu a katechínov (v zmysle kyseliny galovej) v čaji. M.: 1999).

Nevýhodou tejto metódy je použitie toxických organických rozpúšťadiel (izobutylalkohol), ako aj použitie farebnej reakcie s Fe (III), ktorej produktom je farebne nestála farebne časovo nestála farebná zlúčenina.

Známa je aj metóda kvantitatívneho stanovenia tanínov z hľadiska tanínu v listoch skumpie a sumachu metódou komplexometrie po vyzrážaní tanínov soľami zinku (GOST 4564-79. List skumpie. Špecifikácie; GOST 4565- 79. List škumpy. Špecifikácie).

Nevýhodou tejto metódy je trvanie analýzy a náročnosť určenia bodu ekvivalencie.

Známa je aj metóda kvantitatívneho stanovenia tanínov spektrofotometrickou metódou po reakcii s Folinovým-Ciocalteuovým činidlom z hľadiska kyseliny galovej (Smernice pre metódy kontroly kvality a bezpečnosti biologicky aktívnych doplnkov stravy. Návod. R 4.1.1672 -03. - M. - 2004 - s.94-95).

nevýhodou túto metódu je nemožnosť samostatného stanovenia nízko- a vysokomolekulárnych tanínov.

Najbližšie k navrhovanej metóde je, že taníny sa stanovujú spektrofotometricky z hľadiska kyseliny galovej (Smernice pre metódy kontroly kvality a bezpečnosti biologicky aktívnych doplnkov stravy. Smernica. R 4.1.1672-03. - M. - 2004 g. - P 120).

Nevýhodou tejto metódy je opakované riedenie testovanej vzorky, v dôsledku čoho sa zle stanovuje koncentrácia tanínov v roztoku. Aj pri tejto metóde je referenčným roztokom tlmivý roztok, čo sťažuje analýzu. Okrem toho táto metóda neumožňuje oddelene stanoviť obsah tanínov s nízkou a vysokou molekulovou hmotnosťou.

Cieľom vynálezu je zlepšiť presnosť stanovenia tanínov a možnosť oddeleného stanovenia zrážaných a nevyzrážateľných tanínov v rastlinných surovinách.

Problém je vyriešený tým, že vzorka suroviny sa pri varení extrahuje vodou, ochladí, prefiltruje, meria sa optická hustota alikvotnej vzorky pri vlnovej dĺžke 277 nm a obsah súčtu všetkých tanínov vypočítané podľa vzorca

50 - objem banky, ml,

W - vlhkosť suroviny, %,

k alikvotnej časti filtrátu sa pridá 1 % roztok kolagénu v 1 % kyseline octovej, pretrepe sa, prefiltruje, meria sa optická hustota filtrátu pri vlnovej dĺžke 277 nm a obsah vyzrážaných tanínov sa vypočíta podľa vzorca

D 1 - optická hustota roztoku 1,

D 2 - optická hustota roztoku 2,

m nav - hmotnosť vzorky surovín, g,

V a - objem alikvotnej vzorky, ml,

250 - celkový extrakčný objem, ml,

50 - objem banky, ml,

508 - špecifický absorpčný index kyseliny galovej (optická hustota 1% roztoku kyseliny galovej 1 mg / ml),

W - vlhkosť suroviny, %.

Prakticky sa spôsob uskutočňuje nasledujúcim spôsobom. Asi 2,0 (presne odvážených) rozdrvených surovín, preosiatych cez sito s priemerom otvoru 3 mm, dáme do 500 ml banky, zalejeme 250 ml vody zohriatej na bod varu a varíme 30 minút pod spätným chladičom za občasného miešania. Ochlaďte na izbovú teplotu, rozrieďte vodou na 250 ml, prefiltrujte cez vatu, aby sa častice suroviny nedostali do vodného extraktu. Prvých 50 ml filtrátu sa vyhodí.

1 – 4 ml vodného extraktu sa vloží do 50 ml odmernej banky upravenej po značku vodou (roztok 1). Zmerajte optickú hustotu roztoku 1 pri vlnovej dĺžke 277 nm. Na porovnanie sa používa voda.

30 ml vodného extraktu sa umiestni do odmernej nádoby s objemom 50 ml, pridá sa 2-10 ml zrážacieho činidla, pretrepáva sa 30-60 minút, usadí sa, prefiltruje. 1 – 4 ml výsledného filtrátu sa prenesie do banky s objemom 50 ml, upravenej po značku vodou (roztok 2). Zmerajte optickú hustotu roztoku 2 pri vlnovej dĺžke 277 nm. Na porovnanie sa používa voda.

Vynález je ilustrovaný nasledujúcimi príkladmi.

Príklad 1. Na analýzu sa odobrali rastlinné suroviny - dubová kôra.

Asi 2,0 (presne odváženej) drvenej surovej dubovej kôry, preosiatej cez sito s priemerom otvoru 3 mm, sa vloží do 500 ml banky, zaleje sa 250 ml vody zohriatej do varu a varí sa 30 minút pod spätným chladičom za občasného miešania. . Ochlaďte na izbovú teplotu, rozrieďte vodou na 250 ml, prefiltrujte cez vatu, aby sa častice suroviny nedostali do vodného extraktu. Prvých 50 ml filtrátu sa vyhodí.

2 ml vodného extraktu z dubovej kôry sa naleje do odmernej banky s objemom 50 ml, upravenej vodou po značku (roztok 1). Zmerajte optickú hustotu roztoku 1 pri vlnovej dĺžke 277 nm. Na porovnanie sa používa voda. D 1 pre dubovú kôru je 0,595.

30 ml vodného extraktu sa umiestni do odmernej nádoby s objemom 50 ml, pridajú sa 2 ml zrážacieho činidla, pretrepáva sa 30 minút, usadí sa, prefiltruje sa. 2 ml získaného filtrátu sa prenesie do banky s objemom 50 ml, upravenej po značku vodou (roztok 2). Zmerajte optickú hustotu roztoku 2 pri vlnovej dĺžke 277 nm. Na porovnanie sa používa voda. D 2 pre dubovú kôru je 0,276.

Príklad 2. Na analýzu sa odobral rastlinný materiál hadovitého podzemku.

Asi 2,0 (presne odvážené) rozdrvenej suroviny hadcového podzemku preosiateho cez sitko s priemerom otvoru 3 mm sa vloží do banky s objemom 500 ml, zaleje sa 250 ml vody zohriatej do varu a varí sa 30 minút pod spätným chladičom za občasného miešania. Ochlaďte na izbovú teplotu, rozrieďte vodou na 250 ml, prefiltrujte cez vatu, aby sa častice suroviny nedostali do vodného extraktu. Prvých 50 ml filtrátu sa vyhodí.

1 ml vodného extraktu z podzemku špirály sa vloží do odmernej banky s objemom 50 ml, upravenej vodou po značku (roztok 1). Zmerajte optickú hustotu roztoku 1 pri vlnovej dĺžke 277 nm. Na porovnanie sa používa voda.

30 ml vodného extraktu sa umiestni do 50 ml odmernej nádoby, pridá sa 7 ml zrážacieho činidla, pretrepáva sa 60 minút, usadí sa, prefiltruje. 1 ml získaného filtrátu sa prenesie do banky s objemom 50 ml, upravenej po značku vodou (roztok 2). Zmerajte optickú hustotu roztoku 2 pri vlnovej dĺžke 277 nm. Na porovnanie sa používa voda.

Navrhovaná metóda zlepšuje presnosť stanovenia obsahu tanínov v rastlinných surovinách a selektívne určuje vyzrážané a nezrážané triesloviny v rastlinných surovinách.

Metóda stanovenia tanínov v rastlinných surovinách z hľadiska kyseliny galovej, ktorá spočíva v extrakcii vzorky surovín vodou pri varení, chladení, filtrovaní, meraní optickej hustoty alikvotnej vzorky pri vlnovej dĺžke 277 nm a výpočte tzv. obsah súčtu všetkých tanínov podľa vzorca:

kde x a - obsah súčtu tanínov v kyseline galovej, %;

50 - objem banky, ml;
508 - špecifický absorpčný index kyseliny galovej (optická hustota 1% roztoku kyseliny galovej 1 mg/ml);
W - vlhkosť suroviny, %,
k alikvotnej časti filtrátu sa pridá 1 % roztok kolagénu v 1 % kyseline octovej, pretrepe sa, prefiltruje, meria sa optická hustota filtrátu pri vlnovej dĺžke 277 nm a obsah vyzrážaných tanínov sa vypočíta podľa vzorca :

kde X je obsah vyzrážaných tanínov v kyseline galovej, %;
D 1 - optická hustota roztoku 1;
D 2 - optická hustota roztoku 2;
m nav - hmotnosť vzorky surovín, g;
V a - objem alikvotnej vzorky, ml;
250 - celkový objem extrakcie, ml;
50 - objem banky, ml;
508 - špecifický absorpčný index kyseliny galovej (optická hustota 1% roztoku kyseliny galovej 1 mg/ml);
W - vlhkosť suroviny, %.

Podobné patenty:

Vynález sa týka medicíny, menovite psychoneurológie, a opisuje spôsob predpovedania obnovy neurologických funkcií u pacientov v akútnom období ischemickej cievnej mozgovej príhody uskutočňovaním klinických a biochemických štúdií celkovej koncentrácie albumínu (TAC) v krvnom sére v g. /l, kde sa dodatočne do 5.-7. dňa ochorenia stanoví efektívna koncentrácia albumínu (ECA), vypočíta sa rezerva viazania albumínu (RSA) a ak je tento ukazovateľ menší ako jedna, negatívny výsledok obnovenie neurologických funkcií u pacientov v akútnom období ischemickej cievnej mozgovej príhody.

Vynález sa týka medicíny, biologického výskumu v onkológii a možno ho použiť na určenie vývoja malígneho procesu pri nádoroch mozgu po chirurgickej liečbe.

Vynález sa týka medicíny, konkrétne onkológie, a opisuje spôsob hodnotenia účinnosti neoadjuvantnej chemoterapie rakoviny. močového mechúra vyšetrením pacienta, pri ktorom je zaznamenaná maximálna intenzita autofluorescencie nádorových tkanív v zelenej oblasti spektra v štádiu primárnej diagnózy a 1 mesiac po predoperačnej chemoterapii a so zvýšením maximálnej intenzity autofluorescencie nádoru u pacienta. tkaniva o 15 % počiatočného a viac, účinnosť liečby sa hodnotí ako čiastočná regresia nádorového procesu, pri absencii zmien intenzity autofluorescencie nádorového tkaniva od počiatočných je stabilizácia procesu. stanovené, s poklesom intenzity autofluorescencie nádorového tkaniva o 15% alebo viac v porovnaní s počiatočnými, je zaznamenaná progresia nádorového procesu.

1.Stiasny reakcia – so 40 % roztokom formaldehydu a konc. HCl-

Kondenzované taníny tvoria tehlovočervenú zrazeninu

2.brómová voda (5 g brómu v 1 litri vody) - brómová voda sa pridáva po kvapkách do 2-3 ml testovaného roztoku, kým sa v roztoku neobjaví zápach brómu; v prípade prítomnosti kondenzované opálené iónových látok, vzniká oranžová alebo žltá zrazenina.

3. Farbenie s železité soli, železo-amónny kamenec -

čierno-modrá(taníny hydrolyzovateľnej skupiny, čo sú deriváty pyrogallolu)

alebo čierno-zelená ( taníny kondenzovanej skupiny, ktoré sú derivátmi katecholu).

4.Katechíny dať červenú farbu s vanilínom

(v prítomnosti koncentrovanej HCl alebo 70 % H2S04 vznikne jasne červená farba).

Katechíny tvoria v tejto reakcii farebný produkt nasledujúcej štruktúry:

Reakcia, ktorá odlišuje pyrogalické taníny od pyrokatecholových tanínov, je reakcia s nitrózometyluretánom.

Keď sa roztoky tanínov varia s nitrózometyluretánom, pyrokatecholové taníny sa úplne vyzrážajú,

a prítomnosť pyrogalických tanínov možno vo filtráte zistiť pridaním kamenca amónneho železa a octanu sodného - filtrát sa sfarbí do fialova.

Voľná kyselina ellagová po pridaní niekoľkých kryštálov dusitanu sodného a troch alebo štyroch kvapiek kyseliny octovej získa červenofialovú farbu.

7. Byť objavený viazaná kyselina ellagová (alebo haxoxydifénová) kyselina octová sa nahradí 0,1 N. kyselina sírová alebo chlorovodíková (karmínovočervená farba prechádzajúca do modrej).

8. Triesloviny s bielkovinami vytvoriť film nepriepustný pre vodu (opaľovanie). Spôsobujú čiastočnú koaguláciu bielkovín a vytvárajú ochranný film na slizniciach a povrchu rany.

9. Pri kontakte so vzduchom (napr. rezanie čerstvých podzemkov) triesloviny ľahko oxiduje , meniace sa na flobafén alebo sčervenanie, ktoré spôsobujú tmavohnedú farbu mnohých kôr a iných orgánov, infúzií.

Flobafen nerozpustný v studená voda, rozpustiť sa v horúca voda, farbenie odvarov a nálevov hnedá.

10. C 10% roztok stredného octanu olovnatého (súčasne pridajte 10% roztok kyseliny octovej):

vzniká biela zrazenina nerozpustná v kyseline octovej – triesloviny hydrolyzovateľná skupina

(zrazenina sa odfiltruje a stanoví sa obsah vo filtráte kondenzované taníny, s 1% roztokom železo-amónneho kamenca - čierno-zelená farba);

biela zrazenina rozpustný v kyseline octovej - taníny kondenzovanej skupiny.

11. Na identifikáciu jednotlivých zlúčenín použite chromatografická analýza pozorované v UV svetle. Spracovanie chromatogramov sa uskutočňuje roztokom chloridu železitého alebo vanilínového činidla

Štruktúra je stanovená pomocou IR spektier, PMR spektier.

Reakcia s 1% alkoholovým roztokom kamenca železo-amónneho je liekopisná , vykonávané s odvarom surovín - dubová kôra, hadí podzemok, sadenice jelše, čučoriedky;

A to aj priamo v suchých surovinách – dubová kôra, kalina kôra, rizómy bergénie.

Kvantifikácia.

1. Gravimetrické alebo váhové metódy - založené na kvantitatívnom vyzrážaní tanínov želatínou, iónmi ťažkých kovov alebo adsorpciou kožným (nahým) práškom.

Oficiálny v garbiarskom a extraktívnom priemysle je vážená jednotná metóda (BEM):

Vo vodných extraktoch z rastlinného materiálu sa najprv stanoví celkové množstvo rozpustných látok (sušina) vysušením určitého objemu extraktu do konštantnej hmotnosti;

potom sa triesloviny z extraktu odstránia ošetrením beztukovým kožným púdrom; po oddelení zrazeniny vo filtráte sa opäť stanoví množstvo suchého zvyšku.

Rozdiel v hmotnosti sušiny pred a po ošetrení extraktu kožným púdrom ukazuje na množstvo pravých tanínov.

2. Titrimetrické metódy.

Tie obsahujú:

1) Želatínová metóda - Metóda Yakimov a Kurnitskaya- založený na schopnosti tanínov vytvárať nerozpustné komplexy s bielkovinami. Vodné extrakty zo surovín sa titrujú 1% roztokom želatíny, v bode ekvivalencie sa komplexy želatína-tanát rozpustia v nadbytku činidla.

Titer je určený čistým tanínom. Bod valencie sa určí odberom najmenšieho objemu titrovaného roztoku, ktorý spôsobí úplné vyzrážanie tanínov.

Metóda najpresnejšie, pretože umožňuje určiť množstvo pravých tanínov.

Nevýhody: trvanie určovania a náročnosť stanovenia bodu ekvivalencie.

2) Permanganometrická metóda (Leventhalova metóda v Kursanovovej modifikácii). Ide o liekopisnú metódu založenú na ľahkej oxidovateľnosti manganistan draselný v kyslom prostredí v prítomnosti indikátora a katalyzátora kyselina indigosulfónová, ktorá sa v bode ekvivalencie roztoku mení z modrej na zlatožltú.

Vlastnosti stanovenia, ktoré umožňujú titrovať iba makromolekuly tanínov: titrácia sa vykonáva vo vysoko zriedených roztokoch (extrakcia sa zriedi 20-krát) pri teplote miestnosti v kyslom prostredí, za intenzívneho miešania sa pomaly po kvapkách pridáva manganistan.

Metóda je ekonomická, rýchla, ľahko sa vykonáva, ale nie je dostatočne presná, pretože manganistan draselný čiastočne oxiduje fenolové zlúčeniny s nízkou molekulovou hmotnosťou.

3) Na kvantitatívne stanovenie tanínu v listoch sumachu A skumpii používa sa metóda zrážania tanínov síranom zinočnatým a následne komplexometrická titrácia Trilon B v prítomnosti xylenolovej oranže.

Fyzikálne a chemické metódy.

1) Fotoelektrokolorimetrické - sú založené na schopnosti DI vytvárať farebné zlúčeniny s železitými soľami, kyselinou fosfowolfrámovou, Folin-Denisovým činidlom atď.

2) Chromatospektrofotometrické a nefelometrické metódy sa používajú vo vedeckom výskume.

Katedra manažmentu a ekonomiky farmácie, farmaceutickej technológie a farmakognózie

ZÁVEREČNÁ KVALIFIKAČNÁ PRÁCA

Na tému POROVNÁVACIE CHARAKTERISTIKY ČerstvO ZBERANÝCH A HOTOVÝCH LIEČIVÝCH RASTLINNÝCH SUROVÍN OBSAHUJÚCICH TRIELIVÉ LÁTKY

Zoznam skratiek

ÚVOD

KAPITOLA 1. KOBERIELKY

2. 1. Predmety štúdia

KAPITOLA 3

RASTLINNÉ SUROVINY

Bibliografia

ZOZNAM SKRATIEK

BP - krvný tlak

BUV - butanol-kyselina octová-voda

BEM - metóda jednotnej hmotnosti

GSO - štátna štandardná vzorka

GF - štátny liekopis

konc. - koncentrovaný

LS - liek

LP - liek

MPRS - liečivé rastlinné suroviny

ND - normatívna dokumentácia

UV lúče - ultrafialové lúče

ÚVOD

Taníny sú skupinou rôznorodých a komplexných vo vode rozpustných aromatických organických látok obsahujúcich hydroxylové radikály fenolovej povahy.

Taníny sú v rastlinnej ríši rozšírené a majú charakteristickú sťahujúcu chuť. liečivé rastliny obsahujúce triesloviny sú bežné aj vo Voronežskej oblasti.

V súčasnosti sa suroviny a prípravky s obsahom trieslovín používajú zvonka aj vnútorne ako adstringentné, protizápalové, baktericídne a hemostatické prostriedky. Pôsobenie je založené na schopnosti tanínov viazať sa na bielkoviny s tvorbou hustých albuminátov.

Relevantnosť témy je vysvetlená skutočnosťou, že obsah tanínov je hotový lieky(MP) a hotových liečivých rastlinných surovín (PMR) je často menej ako v čerstvo zozbieraných surovinách. Ich obsah ovplyvňuje veľké množstvo faktorov, akými sú podmienky zberu a sušenia, skladovanie samotných surovín a hotovej drogy.

Cieľom diplomovej práce bolo študovať liečivé rastlinné materiály s obsahom trieslovín rastúcich v oblasti Voronež.

Na dosiahnutie tohto cieľa je potrebné vyriešiť nasledujúce úlohy:

Študovať teoretické základy pojmu taníny;

Študovať liečivé rastliny voronežskej oblasti obsahujúce taníny;

Vykonajte rozbor obsahu tanínov v čerstvo zozbieraných a hotových VP.

Ako predmet štúdie boli vybrané čerstvo zozbierané a hotové MMR dvoch rastlinných druhov rastúcich na území Voronežskej oblasti: dub obyčajný (Quercus robur) a trojramenný (Bidens tripartita).

Na stanovenie kvantitatívneho obsahu tanínov v surovinách bola použitá metóda spektrofotometrie.

Výskum bol realizovaný na báze VSMA, na Katedre manažmentu a ekonomiky farmácie, farmaceutickej technológie a farmakognózie.

KAPITOLA 1. KOBERIELKY

1. 1. Všeobecná koncepcia tanínov a ich rozdelenie

Taníny (taníny) sú rastlinné polyfenolické zlúčeniny s molekulová hmotnosť od 500 do 3000, schopné vytvárať silné väzby s proteínmi a alkaloidmi a majú opaľovacie vlastnosti.

Pomenovaný pre svoju schopnosť opaľovať surovú zvieraciu kožu a premieňať ju na odolnú kožu, ktorá je odolná voči vlhkosti a mikroorganizmom, enzýmom, to znamená, že nie je náchylná na rozklad.

Táto schopnosť tanínov je založená na ich interakcii s kolagénom (kožným proteínom), čo vedie k vytvoreniu stabilnej zosieťovanej štruktúry - pokožky v dôsledku výskytu vodíkových väzieb medzi molekulami kolagénu a fenolickými hydroxylmi tanínov.

Ale tieto väzby sa môžu vytvoriť, keď sú molekuly dostatočne veľké na to, aby pripojili susedné kolagénové reťazce a majú dostatok fenolových skupín na vytvorenie priečnych väzieb.

Polyfenolové zlúčeniny s nižšou molekulovou hmotnosťou (menej ako 500) sa adsorbujú len na bielkoviny a nie sú schopné vytvárať stabilné komplexy, nepoužívajú sa ako triesloviny.

Polyfenoly s vysokou molekulovou hmotnosťou (s molekulovou hmotnosťou vyššou ako 3000) tiež nie sú opaľovacími činidlami, pretože ich molekuly sú príliš veľké a neprenikajú medzi kolagénové vlákna.

Stupeň opálenia závisí od povahy mostíkov medzi aromatickými jadrami, t.j. od štruktúry samotného tanínu a od orientácie molekuly tanínu vzhľadom na polypeptidové reťazce proteínu.

Pri plochom usporiadaní tanidu na molekule proteínu vznikajú stabilné vodíkové väzby:

Sila spojenia tanínov s bielkovinou závisí od počtu vodíkových väzieb a od molekulovej hmotnosti.

Najspoľahlivejšie indikátory prítomnosti tanínov v rastlinných extraktoch sú nevratná adsorpcia tanínov na kožný (nahý) prášok a vyzrážanie želatíny z vodných roztokov.

Pojem „taníny“ prvýkrát použil v roku 1796 francúzsky výskumník Seguin na označenie látok prítomných v extraktoch niektorých rastlín, ktoré môžu vykonávať proces opaľovania. Praktické otázky kožiarsky priemysel znamenal začiatok štúdia chémie tanínov.

Iný názov pre triesloviny – „taníny“ – pochádza z latinizovanej podoby keltského názvu pre dub – „tan“, ktorého kôra sa oddávna používala na spracovanie koží.

Prvý vedecký výskum v oblasti chémie trieslovín sa datuje do druhej polovice 18. storočia.

Prvým publikovaným dielom je práca Gledicha z roku 1754 „O použití čučoriedok ako suroviny na výrobu trieslovín“. Prvou monografiou bola Dekkerova monografia z roku 1913, ktorá zhrnula všetok nahromadený materiál o trieslovinách.

Mená najväčších zahraničných chemikov sú spojené so štúdiami štruktúry tanínov: G. Procter, E. Fischer, K. Freidenberg, P. Carrera.

Taníny sú deriváty pyrogallolu, pyrokatecholu, floroglucínu. Jednoduché fenoly nemajú opaľovací účinok, ale spolu s fenolkarboxylovými kyselinami sprevádzajú taníny.

V prírode mnohé rastliny (najmä dvojklíčnolistové) obsahujú triesloviny. Medzi nižšími rastlinami sa nachádzajú v lišajníkoch, hubách, riasach, medzi spórami - v machoch, prasličkách, papradí. Zástupcovia čeľadí borovica, vŕba, pohánka, vres, buk, sumach sú bohatí na triesloviny.

Čeľade Rosaceae, Strukoviny a Myrty zahŕňajú početné rody a druhy, v ktorých obsah trieslovín dosahuje 20-30% alebo viac. Najviac (až 50-70%) trieslovín sa našlo v patologických útvaroch - hálkach. Tropické rastliny sú najbohatšie na triesloviny.

Dub, cinquefoil, hadec, spála, bergénia hrubolistá, garbiareň, ako aj mnohé iné rastliny obsahujú triesloviny zmiešanej skupiny - kondenzované a hydrolyzovateľné.

Taníny sa nachádzajú v podzemných a nadzemných častiach rastlín: hromadia sa v bunkovej šťave. V listoch sa triesloviny alebo taníny nachádzajú v bunkách epidermy a parenchýmu obklopujúcich vodivé zväzky a žily, v podzemkoch a koreňoch sa hromadia v parenchýme kôry a medulárnych lúčov.

1. 2. Klasifikácia tanínov

Taníny sú zmesou rôznych polyfenolov kvôli ich rôznorodosti chemické zloženie klasifikácia je náročná.

Podľa Procterovej klasifikácie (1894) sa triesloviny v závislosti od povahy produktov ich rozkladu pri teplote 180-200 0 C (bez vzduchu) delia do dvoch hlavných skupín:

1. pyrogalové (dáva sa pri rozklade pyrogallolu);

2. pyrokatechín (vzniká pyrokatechín) (tabuľka 1)

V dôsledku ďalšieho výskumu chémie tanidov Freidenberg v roku 1933 spresnil Procterovu klasifikáciu a odporučil označiť prvú skupinu (pyrogalické taníny) ako hydrolyzovateľné taníny a druhú (pyrokatecholové taníny) ako kondenzované taníny.

Väčšinu rastlinných tanínov nemožno jednoznačne priradiť k hydrolyzovateľnému alebo kondenzovanému typu, keďže tieto skupiny nie sú v mnohých prípadoch ostro ohraničené.

Rastliny často obsahujú zmes tanínov z oboch skupín.

V súčasnosti sa najčastejšie používa Freudenbergova klasifikácia, ktorá rozlišuje 2 hlavné skupiny:

1. Hydrolyzovateľné taníny:

Gallotaníny - estery kyseliny galovej a cukrov;

Nesacharidové estery fenolkarboxylových kyselín;

Elagotaníny sú estery kyseliny ellagovej a cukrov.

2. Kondenzované taníny:

Deriváty flavanolov - 3;

Deriváty flavandiolov - 3, 4;

Oxystilbénové deriváty.

1. 3. Metóda stanovenia kvalitatívneho a kvantitatívneho obsahu tanínov v liečivých rastlinných materiáloch

Reakcie na zistenie trieslovín:

Špecifickou reakciou na taníny je precipitačná reakcia želatíny. Použite 1% roztok želatíny v 10% roztoku chloridu sodného. Objaví sa vločkovitá zrazenina, rozpustná v prebytku želatíny. Negatívna reakcia so želatínou naznačuje neprítomnosť trieslovín.

Reakcia so soľami alkaloidov. Amorfná zrazenina vzniká v dôsledku tvorby vodíkových väzieb s hydroxylovými skupinami tanínov a atómami dusíka alkaloidu.

Tieto reakcie poskytujú rovnaký výsledok bez ohľadu na skupinu tanínov.

Reakcie na určenie skupiny tanínov:

Stiasny reakcia - s 40% roztokom formaldehydu a konc. HCl - Kondenzované taníny tvoria tehlovočervenú zrazeninu

Brómová voda (5 g brómu v 1 litri vody) - brómová voda sa pridáva po kvapkách do 2-3 ml testovaného roztoku, kým sa v roztoku neobjaví zápach brómu; ak sú prítomné kondenzované taníny, vytvorí sa oranžová alebo žltá zrazenina.

Farbenie železitými soľami, železno-amónnym kamencom - čierno-modré (taníny hydrolyzovateľnej skupiny, čo sú deriváty pyrogallolu) alebo čierno-zelené (taníny kondenzovanej skupiny, čo sú deriváty pyrokatecholu).

Katechíny dávajú s vanilínom červenú farbu (v prítomnosti koncentrovanej HCl alebo 70 % H 2 SO 4 vzniká jasne červená farba).

Katechíny tvoria v tejto reakcii farebný produkt nasledujúcej štruktúry:

Kvantifikácia.

1) Gravimetrické alebo váhové metódy - založené na kvantitatívnom vyzrážaní tanínov želatínou, iónmi ťažkých kovov alebo adsorpciou kožným (nahým) práškom.

Oficiálnou metódou v garbiarskom a extraktívnom priemysle je metóda zjednotenej hmotnosti (BEM):

Vo vodných extraktoch z rastlinného materiálu sa najprv stanoví celkové množstvo rozpustných látok (sušina) vysušením určitého objemu extraktu do konštantnej hmotnosti; potom sa triesloviny z extraktu odstránia ošetrením beztukovým kožným púdrom; po oddelení zrazeniny vo filtráte sa opäť stanoví množstvo suchého zvyšku. Rozdiel v hmotnosti sušiny pred a po ošetrení extraktu kožným púdrom ukazuje na množstvo pravých tanínov.

2) Titračné metódy

Želatínová metóda - Yakimovova a Kurnitskaja metóda - je založená na schopnosti tanínov vytvárať nerozpustné komplexy s proteínmi. Vodné extrakty zo surovín sa titrujú 1% roztokom želatíny, v bode ekvivalencie sa komplexy želatína-tanát rozpustia v nadbytku činidla. Titer je určený čistým tanínom. Bod valencie sa určí odberom najmenšieho objemu titrovaného roztoku, ktorý spôsobí úplné vyzrážanie tanínov.

Metóda je najpresnejšia, pretože umožňuje určiť množstvo pravých tanínov.

Nevýhody: trvanie určovania a ťažkosti pri stanovení bodu ekvivalencie.

Permanganometrická metóda (Leventhalova metóda v Kursanovovej modifikácii). Táto liekopisná metóda je založená na ľahkej oxidovateľnosti manganistanom draselným v kyslom prostredí za prítomnosti indikátora a katalyzátora kyseliny indigosulfónovej, ktorá sa v bode ekvivalencie roztoku mení z modrej na zlatožltú.

Metóda je ekonomická, rýchla, ľahko sa vykonáva, ale nie je dostatočne presná, pretože manganistan draselný čiastočne oxiduje fenolové zlúčeniny s nízkou molekulovou hmotnosťou.

3) Fyzikálne a chemické metódy

Fotoelektrokolorimetrická metóda. Je založená na schopnosti DI vytvárať farebné chemické zlúčeniny so železitými soľami, kyselinou fosfowolfrámovou, Folin-Denisovým činidlom a inými látkami. Do študovaného extraktu z MPC sa pridá jedno z činidiel, po objavení sa stabilnej farby sa na fotokolorimetri zmeria optická hustota. Percento AI sa určí z kalibračnej krivky zostrojenej s použitím série tanínových roztokov so známou koncentráciou.

Spektrofotometrické stanovenie. Po získaní vodného extraktu sa jeho časť odstreďuje 5 minút pri 3000 ot./min. Pridajte 2 % do centrifúgy vodný roztok molybdenan amónny, potom sa zriedi vodou a nechá sa 15 minút. Intenzita výslednej farby sa meria na spektrofotometri pri vlnovej dĺžke 420 nm v kyvete s hrúbkou vrstvy 10 mm. Výpočet tanidov sa vykonáva podľa štandardnej vzorky. GSO tanínu sa používa ako štandardná vzorka.

Chromatografické stanovenie. Na identifikáciu kondenzovaných tanínov sa získa alkohol (95 % etylalkohol) a vodné extrakty a vykoná sa papierová a tenkovrstvová chromatografia. GSO katechínu sa používa ako štandardná vzorka. Separácia sa uskutočňuje v systémoch rozpúšťadiel butanol - kyselina octová - voda (BUW) (40:12:28), (4:1:2), 5% kyselina octová na papieri Filtrak a doskách Silufol. Detekcia zón látok na chromatograme sa uskutočňuje v UV svetle, po ktorom nasleduje ošetrenie 1 % roztokom železo-amónneho kamenca alebo 1 % roztokom vanilínu, koncentrovaná kyselina chlorovodíková. V budúcnosti je možné vykonať kvantitatívnu analýzu elúciou z platne DV etylalkoholom a vykonať spektofotometrickú analýzu s absorpčným spektrom v rozsahu 250-420 nm.

amperometrická metóda. Podstatou metódy je meranie elektrický prúd vznikajúce oxidáciou -OH skupín prírodných fenolických antioxidantov na povrchu pracovnej elektródy pri určitom potenciáli. Predbežne sa zostrojí grafická závislosť signálu referenčnej vzorky (kvercetínu) od jej koncentrácie a pomocou výslednej kalibrácie sa vypočíta obsah fenolov v skúmaných vzorkách v jednotkách koncentrácie kvercetínu.

Potenciometrická titrácia. Tento typ titrácie vodných extraktov (najmä odvarov z dubovej kôry) sa uskutočnil s roztokom manganistanu draselného (0,02 M), výsledky sa zaznamenali pomocou pH metra (pH-410). Stanovenie koncového bodu titrácie sa uskutočnilo podľa Granovej metódy pomocou počítačového programu „GRAN v. 0. 5.“ Potenciometrický typ titrácie poskytuje presnejšie výsledky, keďže bod ekvivalencie je jasne fixný, čo eliminuje skreslenie výsledkov spôsobené ľudským faktorom.relevantné v porovnaní s indikátorom pri štúdiu farebných roztokov, ako sú vodné extrakty obsahujúce triesloviny.

coulometrická titrácia. Metóda kvantitatívneho stanovenia obsahu tanínov v PM z hľadiska tanínu coulometrickou titráciou spočíva v tom, že skúmaný extrakt zo suroviny reaguje s coulometrickým titračným činidlom - hypojoditovými iónmi, ktoré vznikajú pri disproporcionácii elektrogenerovaného jódu v alkalickom prostredí. . Elektrogenerácia jodových iónov sa uskutočňuje z 0,1 M roztoku jodidu draselného vo fosfátovom tlmivom roztoku (pH 9,8) na platinovej elektróde pri konštantnej sile prúdu 5,0 mA.

Na kvantitatívne stanovenie tanínov v liekoch sa teda používajú také metódy na kvantitatívne stanovenie tanínov v liekoch ako titračné (vrátane titrácie želatínou, manganistanom draselným, komplexometrickej titrácie s Trilonom B, potenciometrickej a coulometrickej titrácie), gravimetrické, fotoelektrokolorimetrické, spektrofotometrické, amperometrické metódy.

1. 4. Použitie trieslovín

Liečivé suroviny obsahujúce triesloviny sa používajú na získanie liekov používaných ako adstringenty, hemostatické, protizápalové, antimikrobiálne látky. Ako antioxidant možno použiť suroviny obsahujúce kondenzované taníny. Okrem toho sa zistilo, že hydrolyzovateľné a kondenzované taníny vykazujú vysokú aktivitu P-vitamínu, antihypoxické a antisklerotické účinky. Kondenzované taníny vykazujú protinádorový účinok, sú schopné uhasiť reťazové reakcie voľných radikálov, čo vysvetľuje ich určitú účinnosť pri chemoterapii rakoviny. A v veľké dávky taníny vykazujú protinádorový účinok, v stredných dávkach sú rádiosenzibilizujúce a v malých dávkach sú protiradiačné.

Suroviny a prípravky s obsahom trieslovín sa používajú zvonka aj vnútorne ako adstringentné, protizápalové, baktericídne a hemostatické prostriedky. Pôsobenie je založené na schopnosti tanínov viazať sa na bielkoviny s tvorbou hustých albuminátov.

Pri kontakte so zapálenou sliznicou alebo povrchom rany sa vytvorí tenký povrchový film, ktorý chráni citlivé nervové zakončenia pred podráždením. Bunkové membrány sa zahusťujú, zužujú cievy, uvoľňovanie exsudátov klesá, čo vedie k zníženiu zápalového procesu.

Pre schopnosť tanínov vytvárať zrazeniny s alkaloidmi, srdcovými glykozidmi, soľami ťažkých kovov sa používajú ako protijed pri otravách týmito látkami.

Navonok na choroby ústnej dutiny, hltana, hrtana (stomatitída, zápal ďasien, faryngitída, angína), ako aj na popáleniny, odvar z dubovej kôry, podzemky bergénie, hadec, mochna, podzemky a korene spály a droga “ Altan“ sa používajú.

Vnútri sa pri ochoreniach tráviaceho traktu (kolitída, enterokolitída, hnačka, dyzentéria) používajú tanínové prípravky (Tanalbin, Tansal, Altan, odvary z čučoriedok, čerešňa vtáčia (najmä v pediatrickej praxi), sadenice jelše, rizómy bergénie, hadec, škorica, podzemky a korene spáleniny.

Ako hemostatické činidlá na krvácanie z maternice, žalúdka a hemoroidov sa používajú odvary z kôry kaliny, podzemkov a koreňov spály, podzemkov cinquefoil, sadenice jelše.

Odvary sa pripravujú v pomere 1: 5 alebo 1: 10. Silne koncentrované odvary by sa nemali používať, pretože v tomto prípade albuminátový film vysuší, objavia sa praskliny a dôjde k sekundárnemu zápalovému procesu.

Experimentálne bol dokázaný protinádorový účinok trieslovín vodného extraktu z exokarpu plodov granátového jablka (na lymfosarkóm, sarkóm a iné ochorenia) a liečiva "Hanerol", získaného na základe súkvetí ohnivca (Ivan-čaj) pri rakovine žalúdka a pľúc. .

Taníny možno použiť ako protijed pri otravách glykozidmi, alkaloidmi a soľami ťažkých kovov.

KAPITOLA 2. PREDMETY A METÓDY VYŠETROVANIA

2. 1. Predmety štúdia

Na území Voronežskej oblasti sú najbežnejšie čeľade rastlín s obsahom trieslovín: Buk - Fagaceae, (dub letný - Quercus robur), Aster - Asteraceae (tripartitná séria - Bidens tripartita), Ružové čeľade - Rosaceae obyčajné - Padus avium) , Vŕba - Salicaceae (vŕba biela - Salix alba), muškáty - Geraniaceae (pelargónie lesné - Geranium sylvaticum) atď.

V tejto práci boli ako objekty štúdia vybrané liečivé rastliny ako dub obyčajný (Quercus robur) a trojramenný (Bidens tripartita).

1) Dub letný (obyčajný) - Quercus robur L. (obr. 1) Použitou surovinou je dubová kôra (Cortex Quercus).

Čeľaď bukovité - Fagaceae

Ryža. 1. Dub letný

Botanická charakteristika. Dub letný je strom vysoký až 40 m, so širokou, rozložitou korunou, kmeňom do priemeru 7 m, tmavohnedou kôrou. Listy obvajcovité, perovito laločnaté, s opadavými palinami, kožovité, hore lesklé, zospodu svetlozelené, krátko stopkaté; kvitnú neskôr ako mnohé druhy stromov. Kvitnutie dubu začína vo veku 50 rokov. Kvitne súčasne s otváraním listov. Kvety sú rovnakého pohlavia: samčie - v visiacich hroznových náušniciach, samičie - sediace, po 1-2, s početnými šupinatými obalmi. Plodom je jednosemenný žaluď, sediaci v čaši na dlhej stopke. Voľne rastúce stromy prinášajú ovocie ročne, v lese - po 4-8 rokoch. Kvitne v máji, plody dozrievajú v septembri.

Rozširovanie, šírenie. európskej časti krajiny. Na severe zasahuje do Petrohradu a Vologdy, východnou hranicou rozšírenia je Ural. Nerastie na Sibíri. Na Ďalekom východe, na Kryme a na Kaukaze sa nachádzajú iné druhy. Dub letný je hlavným druhom listnatých lesov.

Habitat. V lesostepných a stepných zónach na juhovýchode tvorí lesy na povodiach a pozdĺž roklín. Zvyčajne rastie na hnojenej a vlhkej pôde, ale nachádza sa aj na dosť suchých pôdach. Niekedy tvorí rozsiahle dubové lesy.

prázdna. Kôra sa zbiera skoro na jar, počas prúdenia miazgy, keď sa ľahko oddelí od dreva, na miestach rezu z konárov a mladých kmeňov pred rozkvitnutím listov. Kmene starých stromov sú zvyčajne pokryté hrubou korkovou vrstvou s prasklinami. Kôra takýchto stromov je nevhodná na zber. V mladej kôre je oveľa viac tanínov. Na odstránenie kôry urobte kruhové rezy nožom vo vzdialenosti 3035 cm od seba a potom ich spojte pozdĺžnymi rezmi. Odporúča sa hľadať analógy dubu.

Bezpečnostné opatrenia. Ťažba sa vykonáva s povolením lesného hospodárstva na osobitne určených miestach. Dub rastie pomaly.

Sušenie. V tieni, pod prístreškom alebo na dobre vetranom mieste. Je potrebné zabezpečiť, aby sa dažďová voda nedostala do suroviny, pretože premočená kôra stráca značné množstvo trieslovín. Pri sušení sa kôra prevráti; večer ich prinesú do priestorov. Pred balením (kôra sa zviaže do zväzkov) sa usušené suroviny preskúmajú, odstráni sa kôra so zvyškami dreva pokrytými machom.

Vonkajšie znaky. Rúrkové drážkované kusy alebo úzke pásiky rôznych dĺžok, ale nie menej ako 3 cm, hrubé asi 2-3 mm, ale nie viac ako 6 mm. Vonkajší povrch kôry je svetlohnedý alebo svetlosivý, striebristý ("zrkadlový"), zriedkavo matný, hladký alebo mierne zvrásnený, ale bez trhlín. Nápadné sú často priečne pretiahnuté lenticely, vnútorný povrch je žltkastý alebo červenohnedý s početnými pozdĺžnymi tenkými vystupujúcimi rebrami. Lom vonkajšej kôry je zrnitý, rovnomerný, vnútorný je silne vláknitý, „štiepkovitý“. Suchá kôra je bez zápachu, ale keď sa namočí vodou, objaví sa zvláštny zápach. Chuť je silne adstringentná. Keď sa vnútorný povrch kôry navlhčí roztokom železno-amónneho kamenca, objaví sa čierno-modrá farba (taníny). Kvalitu surovín znižuje stará kôra (hrubšia ako 6 mm), stmavnuté kusy a kusy kratšie ako 3 cm, organické nečistoty.

Pri mikroskopii - hnedá zátka, mechanický pás, kamenné bunky vo veľkých skupinách, lykové vlákna s puzdrom nesúcim kryštály, medulárne lúče (na priečnom reze).

Možné nečistoty. Kôra jaseňa - Fraxinus excelsior L. - matná, šedá, ľahko rozlíšiteľná podľa morfologických a anatomických znakov. Pod mikroskopom je viditeľný nesúvislý mechanický pás s malým počtom kamenných buniek. Vlákna bez kryštalickej výstelky.

Chemické zloženie. Kôra obsahuje 10-20% trieslovín (podľa SP XI sa vyžaduje aspoň 8%) - deriváty kyseliny galovej a elagovej; 13-14 % pentosanov; do 6 % pektínu; kvercetín a cukor.

Skladovanie. V suchých, dobre vetraných priestoroch, balené v balíkoch po 100 kg. Čas použiteľnosti do 5 rokov.

farmakologické vlastnosti. Odvary z dubovej kôry majú adstringentné, proteín denaturujúce vlastnosti, ktoré poskytujú protizápalový účinok na vonkajšie aj vnútorné použitie.

V experimentálnych štúdiách pôsobenia odvarov z dubovej kôry zavedených do žalúdka sa zistilo zvýšenie motility žalúdka, zníženie sekrécie šťavy, zníženie enzymatickej aktivity a kyslosti žalúdočného obsahu a spomalenie absorpcie žalúdočnou sliznicou.

Všetky časti rastliny majú dezinfekčný účinok. Kyselina galová a jej deriváty majú širokú farmakologickú aktivitu, podobne ako akcia bioflavonoidy: zahusťujú membrány cievneho tkaniva, zvyšujú ich pevnosť a znižujú priepustnosť, majú antiradiačné a antihemoragické vlastnosti.

Antimikrobiálny a antiprotozoálny účinok je spojený s derivátmi kyseliny galovej aj s prítomnosťou katechínov.

Vodný odvar z lúpaných dubových žaluďov a alkoholová tinktúra 1:5 a 1:10 (s odstráneným alkoholom) u králikov s aloxánovou cukrovkou znižujú hladinu cukru v krvi, zvyšujú množstvo glykogénu v pečeni a v srdcovom svale.

Aplikácia. Odvary z dubovej kôry (1:10) sa používajú pri akútnych a chronických zápalových ochoreniach ústnej dutiny vo forme výplachov, aplikácií na ďasná pri stomatitíde, zápale ďasien a pod.

Ako protijed pri otravách soľami ťažkých kovov, alkaloidmi, hubami, sliepkou, drogou, pri otravách jedlom a iných otravách sa pri opakovaných výplachoch žalúdka používa 20% odvar z dubovej kôry.

Pri popáleninách a omrzlinách sa používa aj 20% odvar z dubovej kôry vo forme aplikácií obrúskov navlhčených studeným odvarom na postihnuté miesta v prvý deň. Pri kožných ochoreniach sprevádzaných plačom, pri detskej diatéze sa používa odvar z dubovej kôry vo forme všeobecných alebo miestnych kúpeľov, umývaní, aplikácií; pri potiacich nohách sa odporúčajú lokálne kúpele z 10% odvaru dubovej kôry alebo odvar z dubovej kôry na polovicu s odvarom šalvie. o gynekologické ochorenia(kolpitída, vulvovaginitída, prolaps pošvových stien, prolaps pošvy a maternice, erózia krčka maternice a pošvových stien) predpísať výplach 10% odvarom.

Menej často sa dubová kôra používa na gastroenterokolitídu, úplavicu, malú gastrointestinálne krvácanie(vo vnútri 10% odvaru), pri proktitíde, paraproktitíde, análnych trhlinách, hemoroidoch, prolapse konečníka (liečivé klystíry, výplachy, aplikácie, sedacie kúpele).

Odvar z dubovej kôry (Decoctum corticis Quercus) sa pripravuje v pomere 1:10. Kôra sa rozdrví na veľkosť častíc nie väčšiu ako 3 mm, vloží sa do smaltovanej misky, zaleje sa horúcou prevarenou vodou, prikryje sa viečko, zahrievané vo vriacom vodnom kúpeli za častého miešania 30 minút , ochladené 10 minút, prefiltrované, stlačené, objem výsledného vývaru sa pridá prevarenou vodou na 200 ml.

V lekárni z liekov obsahujúcich dubovú kôru sú "Dubová kôra" a zubný gél "Vitadent".

"Vitadent" sa používa na liečbu a prevenciu zápalových ochorení ústnej dutiny a parodontu.

"Dubová kôra" sa používa na liečbu stomatitídy, gingivitídy, tonzilitídy, faryngitídy, eliminácie a prevencie zápachu z úst; s popáleninami, omrzlinami, infikovanými ranami, preležaninami, mozoľmi.

2) Trojdielny seriál - Bidens tripartita

Použitá surovina je bylinná postupnosť (Herba Bidentis) (obr. 2)

Ryža. 2. Trojdielny seriál

Botanická charakteristika. Jednoročná bylina vysoká 15 až 100 cm, korene s koreňmi, rozkonárené. Stonka je okrúhla, opačne rozvetvená. Listy sú krátkostopkaté, trojpočetné, s väčším kopijovitým a po okraji zúbkovaným stredným lalokom, usporiadaným opačne. Koše, často jednotlivé na koncoch konárov, dvojradový zábal. Kvety sú rúrkovité, špinavo žlté. Plodom je klinovitá, sploštená nažka, 6-8 mm dlhá, s dvoma "húževnatými" na vrchole. Kvitne od júna do septembra, rodí v auguste až septembri. Možnou prímesou sú iné, spolu rastúce, typy postupnosti. Liečivé vlastnosti radu žiarivých a ovisnutých boli študované a potvrdené, ale ešte nie sú zozbierané, rovnako ako čečina.

Rozširovanie, šírenie. Všade okrem Ďalekého severu.

Habitat. Rastlina je vlhkomilná. Rastie na vlhkých miestach, v močiaroch, na brehoch riek a potokov, v zeleninových záhradách ako burina.

prázdna. Trávu alebo listy dlhé do 15 cm striháme alebo trháme vo vegetačnej fáze až do vytvorenia púčikov. Vo viac neskoré termíny zbierajte iba bočné výhonky. Suroviny sa čistia od hrubých kvitnúcich stoniek. Na plantážach sa používa mechanizovaný zber listových stoniek.

Čeľaď astrovitých - Asteraceae

Bezpečnostné opatrenia. Rastlina sa pestuje. Pri zbere úrody na lúkach nešliapajte strunu a trávnatý porast.

Sušenie. V sušičkách s prirodzeným teplom. Suroviny sú rozložené vo vrstve 5-7 cm.Koniec sušenia je určený krehkosťou stopiek a stoniek. Výťažnosť suchých surovín je 25 %. Na začiatku sušenia treba suroviny denne prevracať. Pri umelom sušení sú povolené teploty do 35-40 °C.

Vonkajšie znaky. Podľa GF XI surovinu tvoria vrchné listnaté stonky dlhé až 15 cm, s púčikmi alebo bez nich. Farba je tmavozelená. Vôňa je zvláštna, zhoršuje sa trením. Chuť je sťahujúca-horká. Nečistoty v podobe stoniek dlhších ako 15 cm, zhnednuté časti a časti iných rastlín, semená znižujú kvalitu surovín. Pravosť surovín je určená vonkajšie znaky a mikroskopicky. Charakteristické sú mnohobunkové chĺpky dvoch typov: húsenica - pozostáva z 9-12 (až 18) krátkych, s tenkými membránami buniek, na báze chĺpku leží predĺžená veľká bunka pokrytá zloženou kutikulou; väčšie chĺpky s hrubými škrupinami - základ vlasu je mnohobunkový, často sú bunky usporiadané v 2-3 radoch; koncová bunka špicatá; povrch chĺpkov s pozdĺžnymi záhybmi kutikuly.

Chemické zloženie. Bylina obsahuje silicu, flavonoidy, deriváty kyseliny škoricovej, triesloviny s vysokým obsahom polyfenolovej frakcie ( najväčší počet vo fáze pučania), polysacharidy (2,46%, GF XI nie menej ako 3,5%), karotenoidy a karotén (hromadí sa v čase kvitnutia až 50-60 mg% vo vrcholoch), kyselina askorbová (počas kvitnutia až 950 mg%)), kumaríny, chalkóny. Rastlina je schopná akumulovať mangán.

Skladovanie. Na suchom mieste zabalené do balíkov, balov alebo vriec. Čas použiteľnosti 3 roky.

farmakologické vlastnosti. Tinktúra sekvencie zavedená do žily zvieraťa má sedatívne vlastnosti, znižuje arteriálny tlak (BP) a súčasne mierne zvyšuje amplitúdu srdcových kontrakcií. Pri pokusoch boli zistené antialergické vlastnosti lopúchových prípravkov, ktoré sa vysvetľujú vysokým obsahom v rastline kyselina askorbová, ktorý stimuluje funkciu nadobličiek a všestranne pôsobí na metabolické procesy v organizme. Antialergický účinok sa prejavuje oslabením symptómov experimentálneho anafylaktického šoku a oneskorením rozvoja Arthusovho fenoménu u zvierat. Pri odstraňovaní hypofýzy u pokusných zvierat nebol pozorovaný antialergický účinok série.

Komplex flavonoidov a polysacharidov, rad tripartitných, klesajúcich a radiálnych, má skutočne choleretické vlastnosti. Kombinácia flavonoidov a polysacharidov klesajúcej série v experimente prevyšuje famín stimulačným účinkom na cholát-syntetizujúcu funkciu, zvyšuje obsah konjugovaných žlčových kyselín a index cholát-cholesterolového koeficientu žlče. Flavonoidy majú hepatoprotektívne vlastnosti, ktoré zahŕňajú choleretické, cholát stimulujúce, protizápalové a kapilárne posilňujúce zložky. Kombinácia radu flavonoidov a vo vode rozpustných polysacharidov zlepšuje vstrebávanie rastlinný komplex postupnosť a zvýšiť jeho aktivitu. V experimente flavonoidy série tripartitných a visiacich eliminovali účinok hepatotropných jedov, obnovili sekréciu žlče a hladinu cholátov na kontrolné hodnoty. Metabolizmus ovplyvňujú aj mangánové ióny nachádzajúce sa v rastline. Sú súčasťou rôznych enzýmových systémov, ovplyvňujú procesy krvotvorby, funkciu pečeňovej bunky, tonus stien ciev, žlčových ciest a sú schopné brániť vzniku intravaskulárnych krvných zrazenín.

Esenciálne extrakty zo série v experimente majú antimikrobiálny účinok proti grampozitívnym baktériám a niektorým patogénnym hubám. Flavonoidné zlúčeniny struny (flavóny a chalkóny) majú bakteriostatické a insekticídne vlastnosti.

Antimikrobiálne a protizápalové vlastnosti prípravkov sekvencie sú spojené aj s tanínmi, ktorým dominujú štruktúrou najjednoduchšie polyfenoly, ktoré majú výraznejšie antimikrobiálne vlastnosti ako taníny, ako sú taníny.

Výrazné antimikrobiálne vlastnosti sekvencie sú tiež spojené s vysokým obsahom mangánu v jej prípravkoch.

Prípravky série pri lokálnej aplikácii zlepšujú tkanivový trofizmus; pri tepelné popálenie u zvierat majú alkoholové extrakty radu protizápalový a ochranný účinok.

Aplikácia. Sekvencia patrí k najstarším ľudovým drogám. Vnútri série sa berie ako diuretikum, diaforetikum a antipyretikum vo forme infúzií a "čajov".

Na ochorenie obličiek a močové cesty odporúča sa nasledovné zber drog: postupnosť 2 diely, medvedica 3 diely, púčiky brezy 1 diel. Zo zberu sa pripravuje odvar.

Séria sa používa na psoriázu, mikrobiálny ekzém, epidermofytózu, alopecia areata. Pri psoriáze sa séria užíva perorálne ako infúzia (20, 0: 200, 0). Vezmite infúziu 1/4 šálky 2-3 krát denne.

Na žihľavku sa používa liečivá zbierka, ktorá obsahuje motýľ, listy žihľavy, trávu (alebo kvety), listy čiernych ríbezlí, korene lopúcha a listy jahôd. Na prípravu nálevu vezmite 1 polievkovú lyžicu z každej rastliny a zalejte 1 litrom studenej vody, na miernom ohni povarte 10 minút, prefiltrujte a užívajte 2 polievkové lyžice každú hodinu, kým vyrážka nezmizne.

Pri kožných chorobách sa vo forme odvaru používa zmes šnúrky, listov žihľavy, kvetov rebríka, listov čiernej ríbezle po 10 g, bylinky fialky trojfarebnej (20 g), koreňa lopúcha (15 g) a listov jahody (15 g) 1 polievková lyžica zberu na 200 ml vody).

Pri kožných ochoreniach (diatéza) a krivici sa séria používa aj ako infúzia (z 10-30 g trávy) do kúpeľa. Nálev sa naleje do kúpeľa a 100 g stolového resp morská soľ. Teplota vody v kúpeli je 37-38°C. S plačlivým ekzémom a diatézou sú predpísané všeobecné a miestne kúpele s povrazom trávy, dubová kôra a kvety harmančeka. Z každej rastliny vezmite 1 polievkovú lyžicu, nechajte 10-12 hodín v 1 litri studenej vody, potom priveďte do varu, prefiltrujte a nalejte nálev do kúpeľa (10 litrov vody na detský kúpeľ, teplota 37-38 °C ). Pri kúpaní pacienta s exsudatívnou diatézou a kožnými vyrážkami sa koncentrácia série môže zvýšiť 2-3 krát. Pri všetkých typoch lokálnych svrbivých dermatóz sa používajú lokálne kúpele (napr. na končatiny, sedacie kúpele na svrbenie hrádze u pacientov cukrovka s hemoroidmi). Pri svrbení v oblasti chrbta, krku, podpazušia a slabín možno odporučiť aplikáciu napareného bylinkového povrazu alebo obkladov so silnými nálevmi. Pri neurodermatitíde, sprevádzanej ťažkým svrbením, sa infúzia sekvencie používa vo forme aplikácií s lokálnymi anestetickými látkami (novokaín, anestezín). Pri plačúcej diatéze u detí sa tkanivo navlhčí odvarom struny a aplikuje sa na pokožku, pričom sa 5-6 krát denne mení pleťová voda. V prípade zápalu sa pleťové vody používajú za studena.

Navonok sa séria používa aj pri liečbe hnisavých rán, trofických vredov s príznakmi zápalu. Séria vysušuje povrch rany a podporuje rýchlejšie hojenie postihnutých oblastí kože. Sekvencia sa používa na prípravu kúpeľov, pleťových vôd a natierok na mikrobiálny ekzém nôh, epidermofytózu ( najlepšie skóre získané pri liečbe intertriginóznej formy epidermofytózy).

Séria sa používa ako kozmetický liek na akné, seboreu. Umývajú si ruky odvarom, vyrábajú kozmetické masky.

Nálev z bylinkovej šnúry (Infusum herbae Bidentis): 10 g byliny sa vloží do smaltovanej misky, zaleje sa 200 ml vody izbovej teploty, prikryje sa pokrievkou, zahrieva sa vo vriacom vodnom kúpeli za častého miešania 15 minút, ochladená na izbovú teplotu počas 45 minút, prefiltrovaná a pridaná voda na objem 200 ml. Vezmite 1 polievkovú lyžicu 2-3 krát denne.

Ako droga existuje "Series of Grass", vyrábaná v dvoch formách: drvená a vo filtračných vreckách. LP obsahujúce trávu zo série zahŕňajú Elekasol, Brusniver.

Brusniver - droga rastlinného pôvodu, má diuretický, antimikrobiálny a protizápalový účinok, používa sa pri ochoreniach urogenitálnych orgánov a konečníka.

Elekasol - kombinovaný liek rastlinného pôvodu, má antimikrobiálny a protizápalový účinok. Aktívne proti stafylokokom, Escherichia coli, Pseudomonas aeruginosa, Proteus. Stimuluje reparačné procesy. Používa sa pri komplexnej terapii ochorení dýchacích ciest a orgánov ORL ( chronická tonzilitída, akútna laryngofaryngitída, akútna a chronická faryngitída tracheitída, bronchitída); v zubnom lekárstve (akútna a recidivujúca aftózna stomatitída, lichen planus ústnej sliznice, paradentóza); v gastroenterológii ( chronická gastroduodenitída enteritída, kolitída, enterokolitída); v dermatológii (mikrobiálny ekzém, neurodermatitída, rosacea, acne vulgaris); v gynekológii (nešpecifické zápalové ochorenia vagíny a krčka maternice, vrátane kolpitídy, cervicitídy, stavy po diatermo- a kryodeštrukcii erózie krčka maternice); v urológii (chronická pyelonefritída, chronická cystitída, uretritída, chronická prostatitída).

2. 2. Technika mikroskopického skúmania liečivých rastlinných materiálov

Na potvrdenie pravosti surovín sa vykonalo mikroskopické vyšetrenie MPC.

Mikroskopické vyšetrenie vzoriek sa uskutočnilo s použitím biologického mikroskopu Motic BA 600 (Motic, Španielsko).

Mikroskop je vybavený binokulárnou hlavicou, širokouhlými okulármi WF 10x/18, 4-drážkovým revolverom, mechanickým stolíkom s možnosťou pohybu preparátu v rozsahu 75x35 mm v smere X a Y, resp. presnosť 0,1 mm, ktorá umožňuje zvoliť optimálnu polohu pozorovaného objektu, má samostatné hrubé a jemné zaostrovanie. Štandardne je použitá digitálna farebná 12-bitová kamera Motic Pro 285A. Mikroprípravok je prezentovaný ako virtuálny prípravok (grafický súbor).

Automatické digitálne skenovanie biologických mikropreparátov sa uskutočnilo pomocou softvéru Motic Educator.

Rastlinný materiál vybraný na mikroskopické vyšetrenie sa vloží do skúmavky a spracuje sa na objasnenie: rastlinný materiál sa naleje do 2-3% roztoku hydroxidu sodného (alebo čistenej vody) a varí sa 1-2 minúty. Potom sa kvapalina opatrne scedí a materiál sa dôkladne premyje vodou a vloží do Petriho misky.

Kúsky surovín sa odoberú z vody skalpelom (alebo špachtľou) a pitevnou ihlou a vložia sa na podložné sklíčko do kvapky roztoku glycerínu alebo vody.

Na podložnom sklíčku sa jeho 4 mm kus rozdelí skalpelom alebo pitevnou ihlou na dve časti; jeden z nich sa opatrne prevráti, aby bolo možné pozorovať surovinu pod mikroskopom z hornej a spodnej strany.

Podložné sklíčka používané na prípravu mikropreparátov musia byť čisté a suché. Sklíčko je prekryté krycím sklíčkom. Pri neopatrnom priložení krycieho sklíčka sa v prípravku často tvoria vzduchové bubliny, preto treba pohár postaviť šikmo, najskôr sa jednou hranou dotknúť tekutiny a potom, pridržiac pohár ihlou, úplne položiť. Zachytené vzduchové bubliny je možné odstrániť ľahkým poklepaním tupým koncom pitevnej ihly na krycie sklíčko alebo miernym zahriatím nad plameňom horáka. Po ochladení sa skúmajú pod mikroskopom, najskôr pri malom zväčšení, potom pri veľkom zväčšení.

Ak tekutina s obsahom nevyplní celý priestor medzi podložným sklíčkom a krycím sklíčkom, alebo sa pri zahrievaní prípravku vyparí, pridáva sa zboku po malých kvapkách. Ak naopak krycie sklíčko voľne pláva prebytočnou tekutinou, treba ho odsať prúžkom filtračného papiera nadvihnutým zboku.

Pri príprave mikroprípravku z hrubých listov sa hrubé žilky predbežne rozdrvia skalpelom a snažia sa odstrániť epidermis z platne alebo po natiahnutí listu oddeliť mezofyl od epidermy, aby bol prípravok tenší.

2. 3. Metóda spektrofotometrického výskumu

Na porovnávacie posúdenie obsahu tanínov v LSR bola použitá metóda spektrofotometrie. Stanovenie sa uskutočnilo na spektrofotometri UNICO-2800.

Pri stanovení bolo pozorované absorpčné maximum vodno-alkoholového extraktu zo suroviny pri vlnovej dĺžke 276±2 nm. Tento indikátor zodpovedá maximálnej absorpcii tanínu, čo umožnilo použiť vlnovú dĺžku 276 ± 2 nm ako analytický indikátor prítomnosti tanínov v surovinách. V procese spektrofotometrického stanovenia tanínov v kôre duba obyčajného bol zistený celkový obsah tanínov v MPC.

Asi 0,8 g (presne odváženej) suroviny rozdrvenej na veľkosť častíc 2 mm sa nalialo do 100 ml vody a zahrievalo sa vo vriacom kúpeli počas 30 minút, potom nasledovalo 30 minút usadzovania pri teplote miestnosti. Výsledný extrakt bol prefiltrovaný cez skladaný papierový filter do 100 ml banky a doplnený po značku vodou.

5 ml získaného extraktu sa vložilo do odmernej banky s objemom 50 ml, doplnené po značku 70% etylalkoholom s vodou. Optická hustota výsledného roztoku sa merala na spektrofotometrickej kyvete s hrúbkou vrstvy 10 mm pri vlnovej dĺžke 274,5 až 277,5 nm vzhľadom na etylalkohol. Paralelne sa merala optická hustota vzorky tanínu.

kde M CT je hmotnosť tanínu; M x - hmotnosť surovín; D CT - optická hustota roztoku CO tanínu; Dx je optická hustota testovaného roztoku.

Spektrofotometrické stanovenie obsahu trieslovín v dubovej kôre sa uskutočnilo na dvoch druhoch surovín: čerstvo zberaných (dátum zberu -05.05.13, zber sa uskutočnil vo vzdialenosti 70 km od mesta orenburg) a pripravených -vyrobený LRS 9vyrába OAO Krasnogorskleksredstva. dátum výroby -01. 4. 2009)

KAPITOLA 3

Bola vykonaná mikroskopická analýza VP duba obyčajného a trojdielnej nory.

Na priečnom reze dubovej kôry je viditeľná hnedá korková vrstva početných radov buniek. Vo vonkajšom kortexe sú drúzy šťavelanu vápenatého, skupiny kamenných buniek a majú diagnostická hodnota takzvaný mechanický pás, tangenciálne umiestnený v určitej vzdialenosti od korku a pozostávajúci zo striedajúcich sa skupín lykových vlákien a kamenných buniek. Vo vonkajšom kortexe sú skupiny vlákien a kamenných buniek rozptýlené smerom dovnútra z pletenca. Niektoré bunky parenchýmu obsahujú flobafény vo forme inklúzií červeno-hnedej farby. Vo vnútornej kôre sú viditeľné početné tangenciálne predĺžené skupiny lykových vlákien s kryštálovou výstelkou, usporiadané do paralelných sústredných pásov. Jednoradové medulárne lúče prechádzajú medzi skupinami vlákien, menej časté sú širšie lúče, ktoré obsahujú skupiny kamenistých buniek v blízkosti kambia, čo spôsobuje tvorbu pozdĺžnych rebier viditeľných na vnútornom povrchu kôry pri vysychaní (obr. 3). Prášok sa vyznačuje prítomnosťou mnohých fragmentov skupín vlákien s kryštálovou výstelkou a skupín kamenných buniek, viditeľné sú kúsky hnedého korku; občas sa vyskytujú drúzy šťavelanu vápenatého; obsah parenchýmových buniek sa farbí roztokom železno-amónneho kamenca v čierno-modrej farbe.

Ryža. 3. Mikroskopia dubovej kôry (úlomok prierezu):

1 - korok; 2 - kollenchým; 3 - drúza šťavelanu vápenatého; 4 - mechanický pás;

5 - kamenné bunky; 6 - lykové vlákna s kryštálovou výstelkou; 7 - jadrový nosník.

Pri skúmaní listu zo série tripartitov je z povrchu viditeľná epidermis hornej a dolnej strany s kľukatými stenami. Stomata sú početné, obklopené 3-5 bunkami epidermis (anomocytárny typ). Po celej listovej čepeli sú jednoduché „húsenicovité“ chĺpky s tenkými stenami, skladajúce sa z 9-12 buniek, niekedy vyplnené hnedým obsahom; na spodnej bunke vlasu je dobre vyjadrené pozdĺžne skladanie kutikuly. Pozdĺž okraja listu a žilkovania sú jednoduché chĺpky s hrubými stenami a pozdĺžnym skladaním kutikuly, pozostávajúce z 213 buniek. Na základni takýchto chĺpkov je niekoľko epidermálnych buniek, mierne stúpajúcich nad povrch listu. Pozdĺž žiliek prebiehajú sekrečné chodby s červenohnedým obsahom, obzvlášť dobre viditeľné pozdĺž okraja listu (obr. 4).

Ryža. Obr. 4. Mikroskopia listu tripartitnej sekvencie: A - epidermis hornej strany listu; B - epidermis spodnej strany listu; B - okraj listu: 1 - chĺpky; 2 - hrubostenné

chĺpky; 3 - sekrečné priechody.

Výsledky spektrofotometrického stanovenia kvantitatívneho obsahu tanínov v surovom dube sú na obr. 5 a tab. 2.

Ryža. 5. Absorpčné spektrá roztokov v 70% etylalkohole:

1 - vodný extrakt z čerstvo zozbieranej rastlinnej hmoty; 2 - odber vody z hotového VP.

Tabuľka 2

Spektrofotometrické stanovenie obsahu trieslovín v tráve tripartitnej sukcesie bolo realizované na dvoch druhoch surovín: čerstvo zberaných (termín zberu - 21.05.13, zber bol realizovaný vo vzdialenosti 70 km od hl. orenburg) a hotové LRS (výrobca Fito-Bot LLC, dátum výroby - 01. 02. 2011)

Výsledky spektrofotometrického stanovenia kvantitatívneho obsahu tanínov v surovinách tripartitného radu sú na obr. 6 a tab. 3.

Ryža. Obr. 6. Absorpčné spektrá roztokov v 70% etylalkohole: 1 - vodný extrakt z čerstvo zozbieranej rastlinnej hmoty; 2 - odber vody z hotového VP.

Je teda vidieť, že obsah tanínov v čerstvo zozbieraných a hotových VP rovnakého rastlinného druhu sa líši. A hoci oba ukazovatele spĺňajú požiadavky regulačnej dokumentácie (ND), obsah trieslovín je vyšší v čerstvo zberaných VP. Rozdiely v hodnotách možno vysvetliť vplyvom podmienok zberu, sušenia a skladovania liečiv, keďže vplyvom rôznych faktorov (svetlo, teplota, vlhkosť atď.) dochádza k oxidácii a hydrolýze tanínov, čo ovplyvňuje kvantitatívny obsah tanínov v surovinách.

Tabuľka 3

ZÁVERY

1. Taníny sú bezdusíkaté, nejedovaté, zvyčajne amorfné zlúčeniny, mnohé z nich sú dobre rozpustné vo vode a alkohole a majú silne sťahujúcu chuť. Na území regiónu Orenburg sa najčastejšie vyskytujú čeľade rastlín s obsahom trieslovín: Buk - Fagaceae, (dub letný - Quercus robur), Aster-Asteraceae (tripartitná séria - Bidens tripartita), Ružové čeľade - Rosaceae obyčajné - Padus avium) , Vŕba - Salicaceae (vŕba biela - Salix alba), muškáty - Geraniaceae (pelargónie lesné - Geranium sylvaticum) atď.

Z uvedených rastlín je potrebné venovať najväčšiu pozornosť takým liečivým rastlinám, ako je dub obyčajný (Quercus robur) a motýľ tripartný (Bidens tripartita), keďže sa najčastejšie vyskytujú v oboch čerstvé, a ako hotový LRS.

2. Ukazovatele obsahu tanínov v surovinách, získané v priebehu štúdia, spĺňajú požiadavky ND.

3. Na základe vykonaného výskumu možno usúdiť, že obsah trieslovín v čerstvo zozbieraných rastlinných surovinách je vyšší ako v hotových VP.

4. Rozdiely v hodnotách možno vysvetliť vplyvom podmienok zberu, sušenia a skladovania liečiv, keďže vplyvom rôznych faktorov (svetlo, teplota, vlhkosť atď.) dochádza k oxidácii a hydrolýze tanínov, čo ovplyvňuje kvantitatívny obsah tanínov v surovinách.

5. Zlepšiť kvalitu liečby a prevencie rôzne choroby, v ktorej sa používajú liečivé prípravky s obsahom trieslovín, bude efektívnejšie používať odvary a nálevy z čerstvo zozbieraných surovín.

BIBLIOGRAFIA

1. Brezgin N. N. Liečivé rastliny oblasti Horného Volhy. - Jaroslavľ, 1984, 224 s.

2. GOST 24027. 2-80 Liečivé rastlinné suroviny. metódy zisťovania vlhkosti, popola, extraktívnych a tanínových látok, silice 06. 03. 1980

3. Danilová N. A., Popová D. M. Kvantitatívne stanovenie tanínov v koreňoch šťavela konského spektrofotometriou v porovnaní s manganatometriou. Bulletin VSU. Séria: Chémia. Biológia. Lekáreň. 2004. Číslo 2. s. 179-182. RU 2127878 C1, 20.03.1999.

4. Divoký úžitkové rastliny Rusko / resp. vyd. A. L. Budantsev, E. E. Lesiovskaya. - Petrohrad: Vydavateľstvo SPHFA, 2001. - 664 s.

5. Kurkin V. A. Farmakognózia: Učebnica pre študentov farmaceutických univerzít. - Samara: LLC "Etching", GOUVPO "SamGMU", 2004. - 1200 s.

6. Kovalev VN Workshop o farmakognózii. Proc. príspevok pre študentov. univerzity: -M., Vydavateľstvo NFAU; Zlaté stránky, 2003. - 512 s.

7. Liečivé rastlinné materiály. Farmakognózia: Učebnica / Ed. G. P. Jakovlev a K. F. Blinová. - Petrohrad: SpetsLit, 2004. - 765 s.

8. Liečivé suroviny rastlinného a živočíšneho pôvodu. Farmakognózia: učebnica. príspevok / Pod. vyd. G. P. Jakovleva. - Petrohrad: SpecLit, 2006. - 845 s.

9. Materiály stránky http: //med-tutorial. en

10. Materiály stránky http: //medencped. en

11. Muravyová D. A. Farmakognózia: Učebnica / D. A. Muravyová, I. A. Samylina, G. P. Jakovlev. - M.: Medicína, 2002. - 656. roky.

12. Nosal M. A., Nosal I. M. Liečivé rastliny v ľudovom liečiteľstve. Moskva JV "Vneshiberika" 1991. -573 s.

13. Workshop o farmakognózii: Proc. príručka pre vysoké školy / V. N. Kovalev, N. V. Popova, V. S. Kislichenko a ďalší; Pod celkom vyd. V. N. Kovaleva. - Charkov: Vydavateľstvo NFAU: Zlaté stránky: MTK - Kniha, 2004. - 512 s.

14. Usmernenie k metódam kontroly kvality a bezpečnosti biologicky aktívnych potravinárskych prídavných látok. Zvládanie. R 4. 1. 1672-03. - M., 2003, s. 120.

15. Sokolov S. Ya., Zamotaev IP Príručka liečivých rastlín. -M.: Osveta, 1984.

16. Referenčná príručka N. I. Grinkevich. Liečivé rastliny. -M.: Vyššia škola, 1991.

Stiahnite si diplom: Nemáte prístup k sťahovaniu súborov z nášho servera.

Na získanie množstva tanínov sa rastlinné suroviny extrahujú horúcou vodou v pomere 1:30 alebo 1:10.

Kvalitatívne reakcie na triesloviny možno ďalej rozdeliť

do 2 skupín:

Ø Všeobecné zrážacie reakcie – na dôkaz trieslovín

Ø Skupina - na zistenie príslušnosti tanínov k určitej skupine

Na detekciu tanínov v rastlinných materiáloch sa používajú tieto reakcie:

1. Špecifickou reakciou na taníny je reakcia zrážania želatíny. Použite 1% roztok želatíny v 10% roztoku chloridu sodného. Objaví sa vločkovitá zrazenina, rozpustná v prebytku želatíny. Negatívna reakcia so želatínou naznačuje neprítomnosť trieslovín.

2. Reakcia so soľami alkaloidov. Amorfná zrazenina vzniká v dôsledku tvorby vodíkových väzieb s hydroxylovými skupinami tanínov a atómami dusíka alkaloidu.

Tieto reakcie poskytujú rovnaký výsledok bez ohľadu na skupinu tanínov.

Reakcie na určenie skupiny tanínov.

1. Stiasnyho reakcia - s 40% roztokom formaldehydu a konc. HCl-

Kondenzované taníny tvoria tehlovočervenú zrazeninu

2. Brómová voda (5 g brómu v 1 litri vody) - brómová voda sa pridáva po kvapkách do 2-3 ml testovaného roztoku, kým sa v roztoku neobjaví zápach brómu; ak sú prítomné kondenzované taníny, vytvorí sa oranžová alebo žltá zrazenina.

3. Farbenie železitými soľami, železo-amónnym kamencom -

čierno-modré (taníny hydrolyzovateľnej skupiny, čo sú deriváty pyrogallolu)

alebo čiernozelené (taníny kondenzovanej skupiny, ktoré sú derivátmi katecholu).

4. Katechíny dávajú červené sfarbenie vanilínom

(v prítomnosti koncentrovanej HCl alebo 70 % H2S04 vznikne jasne červená farba).

Katechíny tvoria v tejto reakcii farebný produkt nasledujúcej štruktúry:

Reakciou, ktorá odlišuje pyrogalické triesloviny od pyrokatecholových tanínov, je reakcia s nitrózometyluretánom.

Keď sa roztoky tanínov varia s nitrózometyluretánom, pyrokatecholové taníny sa úplne vyzrážajú,

a prítomnosť pyrogalických tanínov možno vo filtráte zistiť pridaním kamenca amónneho železa a octanu sodného - filtrát sa sfarbí do fialova.

Voľná kyselina elagová dáva červenofialovú farbu, keď sa pridá niekoľko kryštálov dusitanu sodného a tri až štyri kvapky kyseliny octovej.

7. Na zistenie viazanej kyseliny ellagovej (alebo kyseliny hydroxydifenolovej) sa kyselina octová nahradí 0,1 N. kyselina sírová alebo chlorovodíková (karmínovočervená farba prechádzajúca do modrej).

8. Taníny s bielkovinami vytvárajú vodu nepriepustný film (opaľovanie). Spôsobujú čiastočnú koaguláciu bielkovín a vytvárajú ochranný film na slizniciach a povrchu rany.

9. Pri kontakte so vzduchom (napríklad rezanie čerstvých podzemkov) triesloviny ľahko oxidujú, menia sa na flobafény alebo sčervenania, ktoré spôsobujú tmavohnedú farbu mnohých kôr a iných orgánov, nálevov.

Flobafeny sú nerozpustné v studenej vode, rozpúšťajú sa v horúcej vode, farbiace odvary a nálevy sú hnedé.

10. S 10% roztokom stredného octanu olovnatého (súčasne pridajte 10% roztok kyseliny octovej):

vznikne biela zrazenina nerozpustná v kyseline octovej - triesloviny hydrolyzovateľnej skupiny (zrazenina sa odfiltruje a vo filtráte sa stanoví obsah kondenzovaných tanínov, s 1% roztokom železno-amónneho kamenca - čiernozelené sfarbenie);

biela zrazenina, rozpustná v kyseline octovej - taníny kondenzovanej skupiny.